Сравнительная иммуногистохимическая оценка эндотелиальной экспрессии CD15 в макрососудах клинических групп плацент

микрососудов коррелирует с тяжелой степенью структурной задержки развития ворсинок хориона.

Таким образом, статистически значимо установлено, что повышение экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток в макро- и микроваскулярном русле плацент ассоциируется с нарушением структурного созревания ворсинок хориона. Уровень патологической персистенции CD15+ эндотелиальных клеток в макрососудах хориальной пластинки и стволовых ворсинок и в микроваскулярном русле периферических ворсинок коррелирует со степенью структурной задержки созревания ворсинок хориона. Данный феномен свидетельствует о возможном прямом влиянии степени структурной незрелости ворсинок хориона на изменение уровня экспрессии СD15+ эндотелиальных клеток. Однако данная корреляция степени структурной незрелости плаценты и степени CD15+ васкулярной экспрессии не может являться строго специфичной для данного явления, так как CD15-позитивная реакция также отмечалась и в плацентах со структурным нормальным созреванием и акселерацией развития ворсинок хориона плацент с гетерогенной массой и в различных клинических подгруппах.

На основании полученных результатов исследования мы полагаем, что повышение экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток может свидетельствовать о компенсаторной реакции плацентарных сосудов в стресс- индуцированных условиях фетоплацентарного юнита, сопровождающихся нарушением потенциалов созревания и роста плаценты при патологическом течении беременности. Кроме того, уровень CD15+ эндотелиальных клеток макро- и микроваскулярного русла плацентарных сосудов может отображать не только компенсаторный и адаптационный механизм в условиях нарушенного роста и созревания плаценты, но и степень антенатального гипоксического дистресса плода и служить одним из диагностических критериев при оценке антенатальной плацентарной недостаточности.

3.3 Сравнительная иммуногистохимическая оценка эндотелиальной

Рисунок 21 - Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток в сосудах макроваскулярного русла плацент исследуемых групп с гетерогенными массами и гистологическими фенотипами при различных клинических состояниях, лист 1

I – группа плацент с CD15-негативной экспрессией в макро-, микрососудах и капиллярах плацентарного барьера; II – группа с CD15- позитивным иммуноокрашиванием эндотелия макро-, микрососудов и кПБ; III – группа с CD15-позитивным окрашиванием микрососудов и

кПБ; IV – группа с CD15-позитивным иммуноокрашиванием макрососудов; Нормальная масса плаценты – 25-75 перцентиль; пониженная масса плаценты - < 25 перцентиль; повышенная масса плаценты - >75 перцентиль; сНГВ – нормальное структурное развитие ворсинок хориона для гестационного срока; сАГВ – структурная акселерация развития ворсинок; сЗГВ – структурная задержка ворсинок хориона;

ФБ–физиологическая беременность; ПЭ-преэклампсия; ГСД – гестационный сахарный диабет; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода; БГВП – большой для гестационного возраста плод; МГВП – малый для гестационного возраста плод; АГП – антенатальная гибель плода; *- Статистически значимое отличие от ФБ (p<0,01).; **- Статистически значимое отличие от нормальных и патологических плацент с

гетерогенными массами и гистологическими фенотипами (p<0,01) Рисунок 21, лист 2

Таблица 8 - Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток в макроваскулярном русле плацент исследуемых групп при физиологической и патологической беременности

Подгруппы Группы (n- 593)

Масса плацент

Гистолог ический фенотип

Клинические группы

CD15 – макро и микрососуды

(n-159)

CD15 + макро- и микрососуды

(n-315)

III

CD15 - макрососуды CD15+ микрососуды

(n-110)

CD15 + макрососуды CD15- микрососуды

(n-9) Позитивны

е сосуды (%)

IRS Позитивные сосуды (%)

IRS Позитивны е сосуды

(%)

IRS Позитивны е сосуды

(%)

IRS

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Нормал ьная масса (n-196)

сНГВ (n-59)

ФБ (n-34) 6,7±1,9 0,8±0,4 - - - - - -

ПЭ (n-2) - - - - - - 18,5±0,7^* 4,0±0,0^*

БГВП (n-12) 4,7±1,8 1,0±0,4 - - - - - -

АГП (n-11) - - 66,3±8,1^** 11,2±0,8^** - - - -

сАГВ (n-47)

ПЭ (n-14) - - 29,8±10,6^* 4,9±1,1^* - - - -

HELLP(n-5) 9,6±3,8 1,8±0,4 - - - - - -

ЗВУР (n-11) - - 36,6±7,2^* 5,3±1,3^* - - - -

АГП (n-17) - - 58,2±11,3^** 10,5±1,5^** - - - -

сЗГВ (n-90)

БГВП (n-18) 6,1±0,9 1,1±0,7 - - - - - -

БГВП (n-12) - - 35,9±4,8^* 4,7±1,5^* - - - -

ГСД (n-15) 30,4±4,2^* 5,3±1,2^* - -

ГСД (n-20) - - - - 11,6±3,1 0,8±0,5 - -

АГП(n-12) - - 68,1±16,1^** 10,2±1,6^** - - - -

АГП(n-13) - - - - 10,0±3,5 2,6±1,3 - -

Пониже нная масса (n-198)

сНГВ

(n-17) МГВП (n-17) 6,3±4,3 1,1±0,3 - - - - - -

сАГВ

(n-109) ПЭ (n-33) 8,5±1,9 1,1±0,7 - - - - - -

ПЭ (n-3) - - - - - - 22,0±3,5^* 3,7±0,6^*

НЕLLP(n-8) 9,1±2,7 1,6±0,5 - - - - - -

МГВП(n-13) 8,7±2,4 1,3±0,6 - - - - - -

64 Продолжение таблицы 8

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

ЗВУР (n-19) 7,8±2,0 0,9±0,7 - - - - - -

ЗВУР (n-29) - - 40,1±7,3^* 6,7±0,9^* - - - -

ЗВУР (n-4) - - - - - - 20,0±2,3^* 4,5±0,6^*

сЗГВ

(n-72) ЗВУР (n-15) - - 31,1±4,9^* 4,8±1,0^* - - - -

ГСД (n-16) - - 28,8±5,2^* 5,1±1,0^* - - - -

АГП(n-41) - - 88,9±7,0^** 11,7±0,5^** - - -

Повыше нная масса (n-199)

сНГВ (n-30)

ФБ (n-11) - - - - 5,3±3,1 1,3±0,5 - -

ПЭ (n-10) - - 22,9±7,0^* 4,0±0,0^* - - - -

ПЭ (n-9) - - - - 9,8±3,0 1,2±0,7 - -

сАГВ (n-53)

ПЭ (n-18) - - 28,4±7,7^* 4,2±0,7^* - - - -

ПЭ (n-12) - - - - 5,7±3,1 0,8±0,7 - -

ЗВУР (n-23) - - 26,5±6,2^* 6,5±2,0^* - - - -

сЗГВ (n-116)

ЗВУР (n-15) - - 18,0±2,7^* 5,8±1,6^* - - - -

БГВП (n-25) - - 31,9±9,1^* 5,2±1,1^* - - - -

БГВП (n-23) - - - - 8,6±6,0 1,3±0,8 - -

ГСД (n-20) - - 27,2±5,8^* 4,7±1,7^* - - - -

ГСД (n-22) - - - - 10,5±3,9 1,6±0,5 - -

АГП (n-11) - - 54,0±11,6^** 10,8±1,1^** - - - -

Нормальная масса плаценты – 25-75 перцентиль; пониженная масса плаценты - < 25 перцентиль; повышенная масса плаценты - >75 перцентиль; сНГВ – нормальное структурное развитие ворсинок хориона для гестационного срока; сАГВ – структурная акселерация развития ворсинок; сЗГВ – структурная задержка ворсинок хориона;

* - Статистически значимое отличие от ФБ (p<0,01);

** - Статистически значимое отличие от плацент при физиологической и патологической беременности с гетерогенными массами и гистологическими фенотипами(p<0,01).

Плаценты при патологическом течении беременности с нормальной и пониженной массой при HELLP-синдроме, также имели отрицательный CD15 иммунофенотип, что составило 9,6±3,8% и 9,1±2,7% CD15+ сосудов соответственно, с единичными слабоокрашенными (IRS 1-2) CD15+

эндотелиальными клетками. В ряде плацент с нормальной, пониженной и повышенной массой при беременности с задержкой внутриутробного равития плода, большим для гестационного возраста плодом, гестационным сахарным диабетом и преэклампсией определялся CD15-положительный иммунофенотип макрососудов с прерывистым и фокальным умеренным CD15+

иммуноокрашиванием эндотелиальных клеток, ассоциированных со сНГВ, сАГВ и сЗГВ. Повышение макроваскулярного CD15+ иммуноокрашивания эндотелиальных клеток отмечалось в плацентах с гистологически незрелым фенотипом при беременностях с гестационным сахарным диабетом и большим для гестационного возраста плодом. Плаценты при гестационном сахарном диабете, как и при большом для гестационнного возраста плоде, характеризовались статистически значимо не отличимым друг от друга относительным количеством CD15+ макрососудов, что составило менее <50%

CD15+ сосудов с легкой (IRS 3-4) и умеренной (IRS 6-8) внутрисосудистой экспрессией CD15+ эндотелиальных клеток.

Уровень экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток и относительное количество CD15+ макрососудов в плацентах при задержке внутриутробного развития плода и преэклампсии статистически значимо не отличались от плацент при беременности с гестационным сахарным диабетом и БГВП и характеризовались прерывистой и фокальной легкой и умеренной степенью экспрессии CD15+ маркера. В плацентах при ЗВУР плода и ПЭ при позитивном CD15+ иммунофенотипе макрососудов хориальной пластинки и стволовых ворсинок в ряде наблюдений отмечался CD15-негативный иммунофенотип микрососудов, ассоциированных со сНГВ и сАГВ, нормальной и пониженной массой плацент.

Исследования показали, что в плацентах при патологических беременностях осложненных антенатальной гибелью плода установлено значительное повышение уровня экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток.

При этом отмечено, что они ассоциировались с гетерогенным гистологическим фенотипом (сНГВ, сАГВ и сЗГВ), различной массой (нормальная, пониженная и повышенная) и демонстрировали непрерывное и сильное (IRS 9-12) CD15- положительное иммуноокрашивание макроваскулярных эндотелиальных клеток. Относительное количество CD15+ макрососудов превышало 50% и статисистически значимо отличалось от других плацент при патологическом течении беременности. Стоит отметить, что только 12% плацент при беременности с антенатальной гибелью плода с нормальной массой показали CD15-негативный иммунофенотип макрососудов с единичными слабоокрашенными эндотелиальными клетками, что составило 10,0±3,5%

CD15+ сосудов.

3.3.1 Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при физиологическом и патологическом течении беременности без клинических признаков антенатальной гипоксии/асфиксии плода

Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток в макрососудах плацент при беременности без клинических признаков антенатальной плацентарной недостаточности с гипоксическим дистрессом плода представлена на рисунке 22 и таблице 9.

I – группа плацент с CD15-негативной экспрессией в макро-, микрососудах и капиллярах плацентарного барьера (кПБ); II – группа с CD15-позитивным иммуноокрашиванием эндотелия макро-, микрососудов и кПБ; III – группа с CD15-позитивным окрашиванием микрососудов и кПБ; IV – группа с CD15-позитивным иммуноокрашиванием макрососудов.

Нормальная масса плаценты – 25-75 перцентиль; пониженная масса плаценты - < 25 перцентиль; повышенная масса плаценты - >75 перцентиль; сНГВ – нормальное структурное

развитие ворсинок хориона для гестационного срока; сАГВ – структурная акселерация развития ворсинок; сЗГВ – структурная задержка ворсинок хориона;

ФБ–физиологическая беременность; ПЭ-преэклампсия; ГСД – гестационный сахарный диабет; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода; БГВП – большой для

гестационного возраста плод; МГВП – малый для гестационного возраста плод;

*- Статистически значимое отличие от нормальных плацент при ФБ (p<0,01)

Рисунок 22 - Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток в макрососудах плацент без клинических признаков фетальной гипоксии/асфиксии

Таблица 9 - Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при отсутствии клинических признаков фетальной гипоксии/асфиксии

Подгруппы Группы (n- 223)

Масса плаценты

Гистологиче ский фенотип

Клинические группы

CD15 – макро и микрососуды

(n-103)

CD15 + макро- и микрососуды

(n-37)

III

CD15 – макрососуды CD15+ микрососуды

(n-77)

CD15 + макрососуды CD15- микрососуды

(n-6) Позитивные

сосуды (%)

IRS Позитивные сосуды (%)

IRS

Нормальная масса (n-83)

сНГВ(n-36) ФБ (n-34) 6,7±1,9 0,8±0,4 - - - - - -

ПЭ(n-2) - - - - - - 18,5±0,7^* 4,0±0,0^*

сАГВ(n-9) HELLP (n-5) 9,6±3,8 1,8±0,4 - - - - - -

ЗВУР (n-4) - - 38,8±8,7^* 5,8±1,3^* - - - -

сЗГВ(n-38) БГВП (n-18) 6,1±0,9 1,1±0,7 - - - - - -

ГСД (n-20) - - - - 11,6±3,1 0,8±0,5 - -

Пониженная масса (n-50)

сНГВ (n-17) МГВП (n-17) 6,3±4,3 1,1±0,3 - - - - - -

сАГВ (n-33)

ПЭ (n-10) 8,7±2,0 1,6±0,5 - - - - - -

ЗВУР (n-19) 7,8±2,0 0,9±0,7

ЗВУР (n-4) 20,0±2,3^* 4,5±0,6^*

Повышенна я масса

(n-90)

сНГВ (n-17) ФБ (n-11) - - - - 5,3±3,1 1,3±0,5 - -

ПЭ (n-6) - - - - 9,5±3,6 1,0±0,6 - -

сАГВ (n-6) ПЭ (n-6) - - - - 5,8±2,9 1,3±0,5 - -

сЗГВ (n-67)

ЗВУР (n-15) - - 18,0±2,7^* 5,8±1,6^* - - - -

БГВП (n-10) - - 31,0±9,8^* 5,1±1,2^* - - - -

БГВП (n-23) - - - - 8,6±6,0 1,3±0,8 - -

ГСД (n-8) - - 27,1±6,2^* 5,0±1,1^* - - - -

ГСД (n-11) - - - - 10,9±4,8 1,7±0,5 - -

Нормальная масса плаценты – 25-75 перцентиль; пониженная масса плаценты - < 25 перцентиль; повышенная масса плаценты - >75 перцентиль;

сНГВ – нормальное структурное развитие ворсинок хориона для гестационного срока; сАГВ – структурная акселерация развития ворсинок; сЗГВ – структурная задержка ворсинок хориона;

*- Статистически значимое отличие от плацент при ФБ (p<0,01).

Отсутствие клинических признаков гипоксии/асфиксии плода было обнаружено в 223 случаях (38%). Плаценты преимущественно были представлены случаями с CD15-негативной экспрессией макроваскулярного эндотелия (81%), ассоциированными с нормальной, пониженной и повышенной массой и гетерогенным гистологическим фенотипом при физиологическом течении беременности, HELLP-синдроме, преэклампсии, БГВП, МГВП, ЗВУР плода и ГСД. Плаценты при физиологическом и патологическом течении беременности демонстрировали структурно зрелую мышечную стенку крупных сосудов хориальной пластинки и стволовых ворсинок с хорошей визуализацией наружного и внутреннего слоев васкулярных мышечных волокон (рисунок 23).

а - нормально развитый мышечный слой крупных сосудов хориальной пластинки и стволовых ворсинок. Окраска: гематоксилин и зозин, Ув.:х400. б – функционально «зрелый» CD15-негативный иммунофенотип (IRS 0-2) крупных сосудов плаценты при физиологической беременности. CD15. в - CD15-негативный иммунофенотип (IRS 0-2) макрососудов при HELLP-синдроме. CD15. г - CD15- негативный иммунофенотип (IRS 0-2) макроваскулярного эндотелия при преждевременной отслойке

нормально расположенной плаценты. CD15, Ув.:х400

Рисунок 23 - Структурная зрелость и функциональная CD15 «зрелость»

макроваскулярного русла плацент при физиологическом и патологическом течении беременности

а А б

в г

Плаценты при физиологической беременности демонстрировали единичные слабоокрашенные (IRS 1-2) CD15+ эндотелиальные клетки макроваскулярного русла (6,7±1,9% CD15+ сосудов) и ассоциировались со структурно нормальным для гестационного возраста развитием ворсинок хориона и нормальной массой в пределах 25-75 перцентиль. В 11 случаях (24%) при физиологическом течении беременности плаценты характеризовались повышенной массой с CD15+ иммунофенотипом микроваскулярных эндотелиальных клеток при константно низкой экспрессии CD15+

эндотелиальных клеток в макрососудах (IRS 0-2, 5,3±3,1% CD15+ сосудов).

Установлено, что макроваскулярное русло плацент при HELLP-синдроме и малом для гестационного возрасте плоде характеризовалось CD15- негативным иммунофенотипом с единичными слабоокрашенными CD15+

эндотелиальными клетками. Относительное количество CD15+ макрососудов при HELLP-синдроме и малом для гестационного возрасте плоде статистически значимо не отличалось от плацент при физиологическом течении беременности, что составило 9,6±3,8% и 6,3±4,3% CD15+ сосудов соответственно. В большинстве случаев плаценты при преэклампсии характеризовались единичными слабоокрашенными CD15+ эндотелиальными клетками (IRS 1-2) макрососудов, относительное количество которых статистически значимо не отличалось от плацент при физиологическом течении беременности и только в 2 наблюдениях отмечалось незначительное повышение относительного количества CD15+ макрососудов, что составило 18,5±0,7% с умеренной степенью внутрисосудистой экспрессии CD15+

эндотелиальных клеток.

Популяция плацент при патологическом течении беременности с задержкой внутриутробного равития плода, большим для гестационного возраста плодом, гестационным сахарным диабетом характеризовалась гетерогенной экспрессией CD15+ эндотелиальных клеток. Плаценты с CD15+

иммунофенотипом макрососудов были выявлены только в 43 случаев (19%) и преимущественно были ассоциированы со структурной задержкой для гестационного возраста (77%) и повышенной массой при задержке внутриутробного равития плода, большом для гестационного возраста плоде, гестационном сахарном диабете. Относительное количество CD15+

макрососудов в популяции выше указанных плацент отличалось от плацент при физиологическом течении беременности и характеризовалось прерывистой и фокальной легкой и умеренной внутрисосудистой экспрессией CD15+

эндотелиальных клеток.

3.3.2 Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках антенатальной плацентарной недостаточности с гипоксией/асфиксией плода

В группе плацент с клиническими признаками плацентарной недостаточности с анте-, интранатальной гипоксией плода преобладали плаценты с CD15+ иммунофенотипом макроваскулярного русла (n-314, 85%).

Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток в макрососудах плацент при острой плацентарной недостаточности при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты с клиническими признаками антенатальной гипоксии плода представлена на рисунке 24 и таблице 10.

ФБ–физиологическая беременность; ПЭ-преэклампсия; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода; БГВП – большой для гестационного возраста плод; МГВП – малый для

гестационного возраста плод; АГП – антенатальная гибель плода.

*- Статистически значимое отличие от нормальных плацент при ФБ (p<0,01) Рисунок 24 - Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках острой

плацентарной недостаточности

Таблица 10 - Экспрессия CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках острой плацентарной недостаточности

Подгруппы Группы (n-112)

Масса плацент

Гистоло гически

й феноти

Клиничес кие группы

I CD15 – макро

и микрососуды

(n-56)

CD15 + макро- и микрососуды

(n-31)

III CD15 - макрососуды

CD15+

микрососуды (n-22)

IV CD15+

макрососуды CD15- микрососуды

(n-3) Позит

ивные сосуд ы (%)

IRS Позити вные сосуды

(%)

IRS Позит ивные

сосуд ы (%)

IRS Позит ивные сосуды

(%)

IRS

Норма Норма ФБ 6,7±1, 9

0,8±

0,4

Норма льная масса (n-34)

сНГВ (n-12)

БГВП (n-12)

4,7±1, 8

1,0±

0,4 - - - - - -

сАГВ (n-9)

ПЭ (n-6) - - 29,2±1

1,9^* 4,7±1,

0^* - - - -

ЗВУР

(n-3) - - 32,0±9,

5^*

4,7±1,

2^* - - - -

сЗГВ (n-13)

АГП (n-

13) - - - - 10,0±

3,5

2,6±

1,3 - -

Пониже нная масса (n-47)

сАГВ (n-47)

ПЭ (n-13) 8,4±1, 9

0,9±

0,7 - - - - - -

ПЭ (n-3) - - - - - - 22,0±3,

5^*

3,7±0 ,6^* НЕLLP

(n-8)

9,1±2, 7

1,6±

0,5 - - - - - -

МГВП (n-13)

8,7±2, 4

1,3±

0,6 - - - - - -

Повыш енная масса (n-31)

сНГВ (n-8)

ПЭ (n-5) - - 22,2±7, 2^*

4,0±0,

0^* - - - -

ПЭ (n-3) - - - - 10,3±2

1,3±

0,6 - -

сАГВ (n-23)

ПЭ (n-9) - - 27,0±7, 3^*

4,1±0,

8^* - - - -

ПЭ (n-6) - - - - 5,5±3,

0,3±

0,5 - -

ЗВУР (n-

8) - - 25,6±5,

8^*

4,3±0,

7^* - - - -

ФБ–физиологическая беременность; ПЭ-преэклампсия; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода; БГВП – большой для гестационного возраста плод;

МГВП – малый для гестационного возраста плод; АГП – антенатальная гибель плода;

*- Статистически значимое отличие от плацент при ФБ (p<0,01).

Острая антенатальная плацентарная недостаточность при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты выявлена в 112 случаях (19%). 70% плацент ассоциировалось с CD15-негативным иммунофенотипом макрососудов с единичными слабоположительными (IRS 1- 2) CD15+ эндотелиальными клетками со структурной акселерацией и нормальным развитием ворсинок хориона при преэклампсии, HELLP-синдроме, малом и большом для гестационного возрасте плоде. Плаценты со структурной задержкой развития ворсинок хориона были выявлены при антенатальной гибели плода и характеризовались CD15-негативной экспрессией эндотелиальных клеток в макрососудах, статистически значимо не отличающейся от плацент при физиологическом течении беременности.

Установлено, что CD15-позитивный иммунофенотип эндотелиальных клеток макрососудов хориальной пластинки и стволовых ворсинок был выявлен в 33 случаях (30%) и ассоциировался со структурной акселерацией и нормальным развитием ворсинок хориона для гестационного возраста при преэклампсии и внутриутробной задержке развития плода. CD15-позитивные макрососуды плацент в исследуемых клинических группах демонстрировали прерывистую и фокальную, легкую и умеренную внутрисосудистую CD15+

экспрессию эндотелиальных клеток и составили менее 40% CD15+

макрососудов. Следует отметить, что статистически значимых качественных и количественных отличий экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток между плацентами при патологическом течении беременности при преэклампсии и внутриутробной задержке развития плода в зависимости от массы и гистологического фенотипа не было выявлено.

Хроническая плацентарная недостаточность с клиническими признаками гипоксии/асфиксии плода была установлена в 258 случаях (44%). Из них повышение CD15+ эндотелиальных клеток отмечалось в 247 плацентах (96%).

Показатели оценки экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках хронической плацентарной недостаточности, осложненной антенатальной гипоксией или асфиксией плода представлены на рисунке 25 и таблице 11.

Плаценты в клинических группах исследования при внутриутробной задержке развития плода, большом для гестационного возраста плоде, преэклампсии и гестационном сахарном диабете характеризовались очаговой и прерывистой внутрисосудистой экспрессией CD15+ эндотелиальных клеток в менее 50% CD15-позитивно окрашенных макрососудов хориальной пластинки и стволовых ворсинок. В данной популяции клинических групп, при исследовании плацент выявлено, что отсутствовала статистически значимая разница экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток как внутри, так и межгрупповая в зависимости от массы и гистологического фенотипа.

II – группа плацент с CD15-позитивным иммуноокрашиванием эндотелия макро-, микрососудов и кПБ; III – группа плацент с CD15- позитивным окрашиванием микрососудов и кПБ. Нормальная масса плаценты – 25-75 перцентиль; пониженная масса плаценты - < 25 перцентиль; повышенная масса плаценты - >75 перцентиль; сНГВ – нормальное структурное развитие ворсинок хориона для гестационного

срока; сАГВ – структурная акселерация развития ворсинок; сЗГВ – структурная задержка ворсинок хориона;

ФБ– нормальные плаценты при физиологической беременности; ПЭ-преэклампсия; ГСД – гестационный сахарный диабет; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода; БГВП – большой для гестационного возраста плод; АГП – антенатальная гибель плода.

*- Статистически значимое отличие от плацент при ФБ (p<0,01);

**- Статистически значимое отличие от плацент при физиологической и патологической беременности с нормальной, пониженной, повышенной массой и гетерогенным гистологическим фенотипом (p<0,01)

Рисунок 25 - Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках хронической плацентарной недостаточности

Таблица 11 - Оценка экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток макроваскулярного русла плацент при клинических признаках хронической плацентарной недостаточности

Подгруппы Группы (n- 258)

Масса плаценты

Гистологическ ий фенотип

Клинически е группы

CD15 – макро и микрососуды (n-0)

CD15 + макро- и микрососуды (n-247)

III

CD15 - макрососуды CD15+

микрососуды (n-11)

CD15 + макрососуды CD15- микрососуды (n-0) Позитивные

сосуды (%) IRS Позитивные

сосуды (%) IRS

Норма Норма ФБ 6,7±1,9 0,8±0,4

Нормальная масса (n-79)

сНГВ (n-11) АГП (n-11) - - 66,3±8,1^** 11,2±0,8^** - - - -

сАГВ (n-29)

ПЭ (n-8) - - 29,8±10,6^* 4,9±1,1^* - - - -

ЗВУР (n-4) - - 38,0±2,9^* 5,3±1,5^* - - - -

АГП (n-17) - - 58,2±11,3^** 10,5±1,5^** - - - -

сЗГВ (n-39)

БГВП (n-12) 35,9±4,8^* 4,7±1,5^* - - - -

ГСД (n-15) - - 30,4±4,2^* 5,3±1,2^* - - - -

АГП (n-12) - - 68,1±16,1^** 10,2±1,6^** - - - -

Пониженна я масса (n-101)

сАГВ (n-29) ЗВУР (n-29) 40,1±7,3^* 6,7±0,9^* - - - -

сЗГВ (n-72)

ЗВУР (n-15) - - 31,1±4,9^* 4,8±1,0^* - - - -

ГСД (n-16) - - 28,8±5,2^* 5,1±1,0^* - - - -

АГП (n-41) - - 88,9±7,0^** 11,7±0,5^** - - - -

Повышенна я масса

(n-78)

сНГВ (n-5) ПЭ (n-5) - - 23,6±7,6^* 4,0±0,0^* - - - -

сАГВ (n-24) ПЭ (n-9) - - 29,8±8,2^* 4,2±0,7^* - - - -

ЗВУР (n-15) - - 18,0±2,7^* 5,8±1,6^* - - - -

сЗГВ (n-49)

БГВП (n-15) - - 32,5±8,9^* 5,3±1,0^* - - - -

ГСД(n-12) - - 27,3±5,8^* 4,5±2,0^* - - - -

ГСД(n-11) - - - - 10,0±2,8 1,5±0,5 - -

АГП (n-11) - - 54,0±11,6^** 10,8±1,1^** - - - -

ФБ–физиологическая беременность; ПЭ-преэклампсия; ГСД – гестационный сахарный диабет; ЗВУР – задержка внутриутробного развития плода;

БГВП – большой для гестационного возраста плод; АГП – антенатальная гибель плода;

*- Статистически значимое отличие от плацент при ФБ (p<0,01);

**- Статистически значимое отличие от плацент при физиологичской и патологической беременности с нормальной, пониженной, повышенной массой и гетерогенным гистологическим фенотипом (p<0,01).

Значительное повышение макроваскулярной экспрессии CD15+

эндотелиальных клеток отмечалось в плацентах при хронической плацентарной недостаточности с антенатальной гибелью плода. Относительное количество CD15+ эндотелиальных клеток макрососудов превышало 50% во всех случаях с антенатальной гибелью плода и характеризовалось сильной (IRS 9-12) непрерывной внутрисосудистой CD15+ экспрессией эндотелиальных клеток (рисунок 26).

Результаты исследования показали, что макроваскулярное русло плацент при хронической антенатальной плацентарной недостаточности с антенатальной гибелью плода демонстрировало статистически значимое отличие внутрисосудистой степени экспрессии CD15+ эндотелиальных клеток и относительного количества CD15+ макрососудов в сравнении с плацентами при физиологическом течении беременности и плацентами при ЗВУР плода, ГСД, БГВП, осложненными антенатальной гипоксией плода. В плацентах при антенатальной гибели плода при хронической плацентарной недостаточности статистически значимого внутригруппового отличия как качественной, так и количественной CD15+ эндотелиальной экспрессии в зависимости от массы плаценты не выявлено.

CD15-негативная экспрессия эндотелиальных клеток макроваскулярного русла отмечалась только в 11 случаях (4%) при гестационном сахарном диабете со слабоокрашенными единичными эндотелиальными клетками, без статистически значимого отличия относительного количества CD15+

эндотелиальных клеток макрососудов (10,0±2,8%) от плацент при физиологическом течении беременности. Данные плаценты ассоциировались со

а – прерывистая легкая (IRS 3-4) CD15+ экспрессия эндотелиальных клеток при ГСД. CD15. б – непрерывная сильная (IRS 9-12) CD15+ экспрессия

эндотелиальных клеток при АГП. CD15, Ув.:х400

Рисунок 26 - Структурная зрелость и функциональная CD15+ «незрелость»

макроваскулярного русла плацент при патологическом течении беременности с антенатальным гипоксическим дистрессом плода

а б

структурной задержкой развития ворсинок хориона, повышенной массой и демонстрировали CD15-позитивный иммунофенотипом микроваскулярного русла.

3.4 Сравнительная иммуногистохимическая оценка эндотелиальной

In document Диагностическая значимость CD15-иммунофенотипирования в оценке антенатальной плацентарной недостаточности (бет 60-76)