С.Сейфуллин атындағы Қазақ агротехникалық университетінің
ҒЫЛЫМ ЖАРШЫСЫ
(пәнаралық)
ВЕСТНИК НАУКИ
Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина
(междисциплинарный)
№ 2(101)
Нұр-Сұлтан 2019
А.Қ. Күрішбаев – төраға, ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
А.М. Әбдіров – төрағаның бірінші орынбасары, педагогика ғылымдарының докторы, профессор;
И.Т. Тоқбергенов – физико-математикалық ғылымдарының кандидаты
Р Е Д А К Ц И Я Л Ы Қ А Л Қ А С.Қ. Шәуенов – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
Л.В. Алимжанова – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
В.Г. Черненок – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
Н. Омарқожаұлы – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
Е.И. Исламов – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
Н.А. Серекпаев – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор;
В.К. Швидченко – ауылшаруашылық ғылымдарының кандидаты, доцент;
А.Қ. Бұлашев – ветеринария ғылымдарының докторы, профессор;
И.Т. Жақыпов – ветеринария ғылымдарының докторы, профессор;
С.Қ. Әбдірахманов – ветеринария ғылымдарының докторы, профессор;
А.П. Науанова – биология ғылымдарының докторы, профессор;
Б.С. Майқанов – биология ғылымдарының докторы, профессор;
С.С. Беккужина – биология ғылымдарының докторы, доцент;
Д.З. Есхожин – техника ғылымдарының докторы, профессор;
Б.Б. Өтеғұлов – техника ғылымдарының докторы, профессор;
Н.В. Костюченков – техника ғылымдарының докторы, профессор;
Б.И. Диханбаев – техника ғылымдарының докторы, аға оқытушы;
Грузин В.В. – техника ғылымдарының докторы, профессор;
Е.Ә. Ақжігітов – физика-математикалық ғылымдарының кандидаты, доцент;
Т.А. Құсайынов – экономика ғылымдарының докторы, профессор;
Р.А. Исмаилова – экономика ғылымдарының докторы, доцент;
Г.К. Құрманова – экономика ғылымдарының докторы, доцент;
Е.Қ. Дүйсебай – сәулет докторы, профессор;
А.А. Корнилова – сәулет докторы, профессор;
Ғ.А. Алпыспаева – тарих ғылымдарының докторы, доцент;
А.Қ. Әбдина – философия ғылымдарының докторы, доцент;
Қ.А. Сарбасова – педагогика ғылымдарының докторы, профессор.
Янчева Христина Георгиева – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, профессор, Плов- див аграрлық университеті, Болгария;
Мария Побожняк – ауылшаруашылық ғылымдарының докторы, Краков ауылшаруашылық университеті, Польша;
Кристиан Матиас Бауэр – ветеринарлық медицина докторы, профессор, Ю.Либиг атындағы Гиссен университеті, Алмания;
Андрас Нахлик - PhD докторы, профессор, Батыс Венгрия университеті, Венгрия;
Рейне Калеви Кортет – PhD докторы, профессор, Шығыс Финляндия университеті, Финлян- дия;
Дуглас Дуэйн Роадс - PhD докторы, профессор, Арканзас университеті, АҚШ;
Вайшля Ольга Борисовна – биология ғылымдарының кандидаты, Томск мемлекеттік университеті, РФ;
Антанас Мазилиаускас – техника ғылымдарының докторы, профессор, Александр Стулгин- скис университеті, Литва;
Павел Захродник – техника ғылымдарының кандидаты, профессор, Чех техникалық университеті, Чех Республикасы;
Караиванов Димитр Петков - техника ғылымдарының докторы, профессор, Химиялық техно- логиялар және металлургия университеті, Болгария;
Ибрагим Бин Че Омар – инженерия ғылымдарының докторы, профессор, Малайзия Келантан университеті, Малайзия;
ХэКенг Канг – ГИС технологиялары докторы, Корея елді мекендерді зерттеу институты, Корея;
Маргарита Мори – профессор, Лакуила университеті, Италия;
Катарина Гугерель – жаратылыстану ғылымдарының докторы, Гронинген университеті, Нидерланды.
ISSN 2079-939X
Басылым индексі – 75830
© С.Сейфуллин атындағы Қазақ агротехникалық университеті, 2019 ж.
АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ ҒЫЛЫМДАР
УДК636.2:612.621
РЕЗУЛЬТАТЫ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В УСЛОВИЯХ СЕВЕРО-ВОСТОКА КАЗАХСТАНА
Атейхан Б.1, докторант PhD Бексеитов Т.К.2, д.с.-х.н., профессор Кажгалиев Н.Ж.1,к.с.-х.н., доцент Сейтеуов Т.К.2,доктор PhD, ассоц.профессор Кайниденов Н.Н.2, магистр Касенов Е.К.2, магситр
1Казахский агротехнический университет имени С. Сейфуллина, пр.Жеңіс 62 г. Нур-Султан,010011, Казахстан
2Павлодарский государственный университет имени С. Торайгырова, ул. Ломова, 64 г. Павлодар, 140008, Казахстан Аннотация
В статье определено влияние метода индукции полиовуляции у коров-доноров, обеспечи- вающего пролонгацию действия фолликулостимулирующих препаратов на морфологию яични- ков и качество эмбрионов, подтверждена физиологичность, мало инвазивность, экономическая целесообразность способов индукции полиовуляции с использованием пролангаторов у коров- доноров, а также способов извлечения, оценки качества и пересадки эмбрионов.
Определены критерии отбора коров-доноров и реципиентов с учетом их физиологического состояния, состояния репродуктивной системы, функциональной активности яичников в ответ на действие гормонов. Выявлены различия в морфологии и скорости развития эмбрионов, полу- ченных от коров-доноров симментальской породы. Полученные результаты позволяют сделать вывод, что применение метода трансплантации эмбрионов в молочном скотоводстве в короткое время позволит резко увеличить поголовье высокопродуктивного стада, тем самым реализовать в полной мере генетический потенциал.
Ключевые слова: эмбрион, крупный рогатый скот, бластоциста, морула, трансплантация, гормоны, яичники, корова-донор, реципиент.
Введение
Актуальной проблемой современного животноводства является полное удовлетворе- ние потребностей населения высококачествен- ными продуктами питания.По прогнозам учен- ных к 2030 году население земли достигнет 9,5 млрд. людей, что в свою очередь подтолкнет на увеличение мирового произ-водства про- дуктов питания с меньшими ресурсами и как следствие, повлечет за собой большое количе- ство проблем связанных с их производством.
Для увеличения производства мясомо- лочной продукции необходимо использовать биотехнологические методы ускоренного вос- производства крупного рогатого скота, а так же проводить строгий отбор и выбраковку жи- вотных с учетом их генетического потенциала.
Трансплантация эмбрионов открыва-
ет огромные возможности в реализации ре- продуктивно-биологического потенциала животных, при использовании индивидуаль- но-направленного генетического резерва с хозяйственно-полезными признаками, с за- данными фенотипическими и генотипически- ми характеристиками, а так же последующего максимального тиражирования их встадах ре- ципиентов с наименее ценными показателями.
Эмбриотрансфер – прогрессивный ме- тод улучшения породных и продуктивных качеств животных, позволяющий получить потомство с улучшенными генетическими свойствами, существенно увеличив поголовье высокоценного скота. Оплодотворенные яйце- клетки (зиготы, эмбрионы) получают от гене- тически ценной коровы, на седьмой день после
ее осеменения, до прикрепления эмбриона к стенке матки. Эмбрион пересаживают в матку коровы-реципиента, которая служит в каче- стве «суррогатной матери» и не имеют ценных свойств. В случае, если пересадка окажется результативной и эмбрион приживется, то по истечении нескольких месяцев беременности на свет появляется новорожденное животное, значительно превосходящее реципиента по своему генетическому потенциалу[1,2].
В качестве доноров эмбрионов исполь- зуют телок или коров, обладающих высоко- ценным генетическим и породным потенци- алом, в возрасте от 14 месяцев. Коров можно использовать для трансплантации после отела (но не ранее, чем через 2 месяца) и окончания послеродового периода, когда матка полно- стью восстановилась и возобновились половые циклы. В качестве доноров используют самых ценных и качественных племенных животных.
Качество донора определяется по таким кри- териям, как племенная ценность, количество и качество молочной продукции, экстерьер, общее развитие, полноценный половой цикл и т.д.[1,2,3].
Многие авторы рекомендуют проводить отбор животных для трансплантации эмбрио- нов с учетом дополнительных критериев, отра- жающих гормональный статус и метаболиче- скую активность потенциальных доноров. При этом практическое значение имеет способ- ность донора к множественной овуляции, к по- лучению от него жизнеспособных эмбрионов.
Считают, что для получения от донора не ме- нее 10 овуляций и 6 жизнеспособных эмбрио- нов необходимо, чтобы в нулевой день полово- го цикла в крови коров содержание эстрадиола было на уровне 15,4 нг/мл, тестостерона – 0,18
нг/мл, ЛГ – 1,46 МЕ/л. Уровень прогестерона на 10-й день полового цикла – от 2,0 до 5,0 нг/
мл (в среднем 3,55) и ЛГ – 1,54 МЕ/л. Вызыва- ние суперовуляции может быть эффективным при содержании в крови холестерина не менее 3,55 ммоль/л, β-каротина – 8,88 мкмоль/л, ви- тамина А – 4,36 мкмоль/л и активности алани- наминотрансферазы – не менее 0,24 мкмоль/л.
[2,3].
В качестве реципиента можно исполь- зовать животных любых пород, с учетом осо- бенностей, отражающихся на размере и массе новорожденного. Коровам можно проводить трансплантацию эмбрионов после родов и окончания послеродового периода, на фоне восстановившихся половых циклов. Реци- пиентом может стать малоценное животное, не предназначенное для воспроизводства ре- монтного молодняка. Для объективной оценки функциональной активности яичников живот- ных-реципиентов и снижения эмбриональной смертности при трансплантации, проводят оценку качества желтых тел в яичнике. Учи- тывают также уровень гормонально-метабо- лического гомеостаза реципиентов, особенно – на 6-7 день естественного или индуциро- ванного полового цикла. Пересадку эмбрио- нов рекомендуется проводить реципиентам с уровнем прогестерона в крови от 2,0 до 4,9 нг/
мл, независимо от результатов оценки желтого тела. Соотношение прогестерона к эстрадиолу должно быть 1:10. В случае использования те- лок в качестве реципиентов с уровнем проге- стерона свыше 5 нг/мл, приживляемость сни- жается на 10-17 %, ниже 2,0 нг/мл – на 25-30
%. Содержание холестерина должно быть в пределах от 2,60-3,90 мкмоль/л, β-каротина – 12,2-17,3 мкмоль/л.[4,5].
Материалы и методика исследований Исследования проводились в двух хозяй- ствах Павлодарской области, ТОО «Галицкое»
Успенского района и ТОО «Победа» Щербак- тинского района. Хозяйства занимаются раз- ведением молочно-мясной симментальской породы крупного рогатого скота.
В качестве коров-доноров отбирали кли- нически здоровых животных, без гинекологи- ческих заболеваний, с удоем 6000-8000 кг за лактацию, живой массой 500-650 кг. Было ото- брано 8 коров-доноров.
В качестве реципиентов также исполь-
зовали здоровых животных, с полноценным половым циклом, живой массой свыше 350 кг.
Трансплантацию эмбрионов проводили по общепринятой методике. За один день до начала гормональной обработки оценивали со- стояние матки и яичников животных. Вызыва- ние суперовуляции у коров-доноров проводи- ли с помощью гормона Плусет (ФСГ) (10 мл на каждую голову) два раза в сутки с интервалом в 12 часом в понижающихся дозах. Схема об- работки доноров представлена в нижеприве- денной таблице.
Таблица 1 – Схема вызывания суперовуляции
Время полового цикла Гормон Плусет (ФСГ)
Утром 06:00 часов Вечером 18:00 часов
0 день Половая охота донора
11 день 1,5 мл 1,5 мл
12 день 1,5 мл 1,5 мл
13 день 1,0 мл 1,0 мл
14 день 1,0 мл+2,0 мл
простогландин (магэстрофан)
1,0 мл+2,0 мл простогландин (магэстрофан) 16 день или 0 день цикла
(прибытие половой охоты) Искусственное осеменение
(по 2 дозы) Искусственное осеменение (по 2 дозы)
7 день цикла Вымывание эмбрионов
Реципиентов обрабатывали простаглан- дином на третий день после начала стимуля- ции суперовуляций у доноров. Донорам инъе- цировали простагландины (магэстрофан) на 4 день вечером. Это делали потому, что половая охота быстрее проявляется у доноров с суперо- вуляцией, чем у реципиентов.
Коров-доноров осеменяли искусственно два раза, с интервалом 12 часов, так как не все яйцеклетки созревают одновременно.
Вымывание эмбрионов проводили с по-
мощью катетера Фоллей, в каждый рог матки вводили по 300-500 мл среды Дюльбекка. Рас- твор с эмбрионами отстаивали при комнат- ной температуре 10-15 минут для того чтобы эмбрионы перешли в нижнюю треть емкости.
Отстоявшийся раствор с эмбрионами порци- онно разливали в чашки Петри и с помощью стереоскопического микроскопа NikonSMZ 745 наблюдали присутствие или отсутствие эмбрионов.
Основные результаты исследований Вымывание проводили через неделю после искусственного осеменения. Повторяли несколько раз, одновременно проводили мас-
саж рога матки, с целью отделения всех эмбри- онов от стенок матки.Результаты представле- ны в таблице 2.
Таблица 2 – Количество и качество полученных эмбрионов
№ Идентификаци- онный номер
донора
Количество полученных
эмбрионов Качество эмбрионов
всего пригодные непригодные
n % n % n %
1 KZS178874122 20 100,0 20 100,0 - -
2 KZS178685616 14 100,0 12 85,7 2 14,3
3 KZS178865888 1 100,0 1 100,0 - -
4 KZS178863784 19 100,0 16 84,2 3 15,8
5 KZS178873964 7 100,0 7 100,0 - -
6 KZS178863784 10 100,0 9 90,0 1 10,0
7 KZS178779002 14 100,0 12 85,7 2 14,3
8 KZS178777715 17 100,0 3 17,6 14 82,4
Всего 102 100,0 80 78,4 22 21,6
От 8 коров-доноров всего получено 102 эмбриона. В среднем от каждого донора полу- чили 12,7 эмбриона. Однако количество полу- ченных эмбрионов от каждого донора сильно варьировалось. Например, от донора 1 полу-
чено 20 эмбрионов, но от донора 3 всего один эмбрион. Это связано с тем, что действие гор- мона на каждый организм индивидуально. Это зависит прежде всего от состояния органов репродуктивной системы, физиологии ооцито-
образования и т.д.
По результатам пригодности эмбрионов к трансплантации 78,4 % – пригодны к транс- плантации, 21,6 % – непригодны. Причиной низкой результативности при гормональной стимуляции коров-доноров может быть вос- паление репродуктивных органов (сальпин- гит, эндометриты) и нарушение иммунной системы. На эмбриопродуктивность животных влияет также продолжительность послеродо- вого периода в связи с физиологической го- товностью организма к множественному росту антральных фолликулов под воздействием эк- зогенных гормонов. Оптимальный период для
индуцирования полиовуляторного ответа – 60- 90 день после отела, так как в последующем повышается вероятность заболевания репро- дуктивных органов.
Основным этапом исследований явля- лось морфологическая оценка качества эмбри- онов. Установлено, что результаты имплан- тации эмбрионов зависят от того, насколько полно оценена способность оплодотворенных яйцеклеток к развитию. В результате оценки эмбрионов по результатам морфологического исследования степени развития и адсорбцион- ных свойств оболочек брак составляет около 25 %, что соответствует средним значениям.
Рисунок 1– Отбор эмбрионов из жидкости для промывания Оцениваемые морфологические при-
знаки жизнеспособных эмбрионов: объем, характер окраски, расположение клеток, ве- личина перивиталлинового пространства и вид неповрежденной зоны пеллюцида. Форма идеального эмбриона – сфера, он должен быть
компактным, однороднойокраски, с клетками равного размера; гладкой зоной пеллюцида, плоской и равномерно сформированной, без включений в перивителлиновом пространстве.
Наглядно морфология полученных эмбрионов показана на рисунке 2.
Неоплодотворенная яйцеклетка Ранняя морула
Компактная морула Ранняя бластоциста Рисунок 2 – Морфология полученных эмбрионов
Количественные и качественные показатели эмбрионов представлены в таблице 3.
Таблица 3 – Качественные и количественные показатели Идентификаци-
онный номер донора
Всего Стадии развития эмбрионов
ранняя
морула компактная
морула ранняя
бластоциста неоплодотворенные яйцеклетки
n % n % n % n % n %
KZS178874122 20 100 - - 2 10,0 18 90,0 - -
KZS178685616 14 100 - - 3 21,4 9 64,3 2 14,3
KZS178865888 1 100 - - - - 1 100 - -
KZS178863784 19 100 1 5,3 2 10,5 14 73,7 2 10,5
KZS178873964 7 100 - - 3 42,8 4 57,2 - -
KZS178863784 10 100 - - 4 40,0 5 50,0 1 10,0
KZS178779002 14 100 1 7,1 2 14,3 10 71,5 1 7,1
KZS178777715 17 100 7 41,2 3 17,6 - - 7 41,2
Всего 102 100 9 8,8 19 18,6 61 59,8 13 12,8
Из 102 полученных эмбрионов 8,8 % – находились в стадии ранней морулы, 18,6 % – в стадии компактной морулы, 59,8 % – ранняя бластоциста и 12,8 % – неоплодотворенные яйцеклетки. Итого в стадии морулы наблюда- ем 27,4 % от всего количества эмбрионов, а в стадии бластоциста – 59,8 % соответственно.
Результаты показывают, что морфоло- гическое развитие эмбрионов никак не связа- но с количеством полученных эмбрионов, все зависит от особенностей онтогенеза, развития половой системы.
По имеющимся данным, наступление стельности при пересадке эмбрионов в ниж- нюю и среднюю треть рога матки составляет 25-37,5 %, а при их трансплантации в верхнюю треть достигает 40-50 %, то есть оптимальное
расположение семидневного эмбриона име- ет прямое воздействие на гормон опосредо- ванную сигнальную систему по механизму обратной связи. Эмбриотрансфер проводили по методу иновуляции, при котором исполь- зовали жесткий шприц-катетер модификации Кассу. В качестве реципиентов использовали 34 телок не ценных в племенном отношении.
Реципиентам делали эпидуральную анестезию раствором новокаина 2 %. Для транспланта- ции использовали нативные эмбрионы, полу- ченные invivo, отличного качества на стадии развития – компактная морула и ранняя бла- стоциста. Факт стельности определяли через 2 месяца после трансплантации. Результаты ра- боты представлены в таблице 4.
Таблица 4 – Результаты трансплантации в ТОО «Галицкое»
Реципиент, дата пересадки
Всего
пересажено Прижившиеся
эмбрионы Неприжившиеся
эмбрионы
n % n % n %
Телки
03.03.2018 7 100 3 42,8 4 57,2
Телки
25.03.2018 5 100 2 40,0 3 60,0
Телки
16.04.2018 6 100 3 50,0 3 50,0
Телки
04-05.07.2018 16 100 10 62,5 6 37,5
Всего 34 100 18 52,9 16 47,1
Рисунок 3 – Первые телята-трансплантанты
Теперь, проведя морфологическую оценку полученных эмбрионов от коров-до- норов, проведем сравнение некоторым раннее полученных результатов с нашими исследова- ниями.
Н.Сергеев, А.Амарбаев и Л.К. Эрнст в результате проведенных исследований на 6 и 7 сутки от коров-доноров и телок получили 1512 эмбриона, провели их морфологическую оценку.По данным авторов от всех получен- ных на 6 сутки эмбрионов 27,4 % составили эмбрионы на стадии ранней морулы, 69,3 % - на стадии компактной морулы, 3,3 % – ран- ней бластоцисты.А 7 сутки количество морул уменьшилось, а доля видов бластоцисты уве- личилась. В частности изменилось: на стадии ранней морулы – 9 %, морула – 10,2 %, ранняя бластоциста – 79,5 %, расширенных бласто- цист – 1,3 %. Из всех исследованных эмбри-
онов 38,2 % являются морфологически нор- мальными и соответствуют стадиям развития.
Однако, подвергшиеся дегенерации эмбрио- ны составили 24,1 %, неоплодотворенные – 37,7 %.Число годных эмбрионов было выше у взрослых коров-доноров, чем у телок и со- ставило 33,6 и 46,8 % соотвественно. У телок встречаемость неполотворенных яйцеклеток выше (42,8 и 28,4 % соотвественно) [6,7].
В Баварии (Германия) М. Аятханұлы, К.
Лейдинг, Х. Н. Ноонер от 47 доноров симмен- тальской породы получили 791 эмбрион, опре- делили стадии развития.В результате исследо- ваний получили 63,8 % – годных к пересадке, 15,1 % – негодных, 21,1 % - неоплодотворен- ных яйцеклеток.Полученные на 7 сутки после оплодотворения эмбрионы по стадиям разви- тия распределились следующим образом, 22,8
% – ранняя морула, 49,62 % – морула,16,26 % Обсуждение полученных данных и заключение
– ранняя бластоциста, 11,32 % – расширенная бластоциста [8].
69,9 % полученных зарубежными уче- ными эмбрионов от 202 коров-доноров при применении фоллитропина оказались годны- ми к трансплантации.Из них 76,6 % – морула, 23,4 % – на стадии бластоцисты [9].
Ученые Павлодарского государственно- го университета провели сравнительные ис- следовательские работы по определению ко- личества и качества эмбрионов, полученных от 6-10 летных взрослых коров-доноров сим- ментальской породы и 18-24 месячными тел- ками. В результате исследований от 7 взрос- лых коров получили 58 эмбрионов, от 5 телок – 29 эмбрионов. Из эмбрионов, полученных от взрослых коров 49 – годных, 9 – негодны к пересадке, Из полученных от телок эмбрио- нов 16 годных, 3 – негодных.6,9 % эмбрионов от взрослых коров-доноров на стадии ранней морулы, 39,7 % – компатная морула, 27,6 % – ранняя бластоциста, 17,2 % – бластоциста, 8,6
% – расширенная бластоциста.10,3 % эмбрио- нов от телок на стадии ранней морулы, 51,7 % – компатная морула, 34,5 % – ранняя бластоци- ста, 3,5% – бластоциста [10].
По данным литературных источников и полученных нами результатов, стадии раз- вития эмбрионов, полученных от суперову- лированных коров с помощью гонадотропина одинаковы.
Все исследования подтверждают, что из полученных эмбрионов в основном встре- чаются стадии компактной морулы и ранней бластоцисты.
Сравнивая с естественными условиями, такое быстрое и позднее развитие эмбрионов в яйцеклетках самок связывают с многообраз- ными пузырями, образованными сверх нормы.
Много пузырьков в яйце не могут развивать- ся равномерно. Часть из них развивается нор- мально, другая раньше, следующая – поздно.
Из-за этого созревание пузырьков варьирует- ся. Из-за различных созревших пузырьков, яй- цеклетки понемногу уменьшаются, и процесс овуляции длится 4-12 часов [11].
Объединение сперматозоидов с яйце- клетками продлевает процесс оплодотворение на некоторое время. Кроме того, в организме повышается содержание гормона эстрогена, выделяющегося из большого количества пу- зырьков. За счет х влияния эмбрион гораздо быстрее двигается по яйцепроводу к полости
рогам матки чем при естественном движении.
В результате нарушения равновесия гормонов в организме меняются и нормальные условия внутри матки.По этим причинам можем резю- мировать, что меняется и развитие эмбрионов, полученных от суперовулированных коров.
Кроме того можно сказать, что влияние таких факторов как тип гормона, порода КРС, время и способ получения эмбрионов, половой цикл, повторение суперовуляций, очень большое [12].
Результаты развития эмбрионов, транс- плантированных нехирургическим методом, в разных странах различные. Например, в сред- нем на Украине 49,3 % [13], в России -57 % [14]. На территории Баварии в Германии о 63- 71 % отелившихся коровах [15].
А в Америке результат трансплантации эмбрионов связат с тем, что используется за- мороженные эмбрионы, или свежие. Если при трансплантации свежевымытых эмбрионов рождается 60-70 % телят, то от глубокозамо- роженных – 50-60 %[16].
Смотря результаты канадцев, при транс- плантации свежих эмбрионов рождается 77,1
% телят, а при использовании глубокозаморо- женных – 68,7 % [17].
Ученые ТОО «Казахский научно-иссле- довательский институт животноводства и кор- мопроизводства» Алматинской области прове- ли трансплантацию 566 эмбрионов и получили 202 теленка, то есть приживаемость эмбри- онов составила - 35,7 %. Однако стельность реципиентов в разных хозяйствах различная (33,3–75,8 %) [18].
Ученые ТОО «Научно-инновационный центр животноводства и ветеринарии» г. Аста- на в 2010-2012 годы в разных областях респу- блики от разных пород КРС получили эмбрио- нов, в среднем результат трансплантации 36,2
%, но также в разных хозяйствах на разном уровне (8,5–55,1 %)[19].
ТОО «АТК» Костанайской области за- купили 565 глубокозамороженных эмбрионов у американской компании TransOva genetics, провели эмбриотрансфер реципиентам мясно- го направления. Результат развития составил 34 % [20].
Сравнивая наши результаты с выше- изложенными результатами наблюдаем, что наши результаты ниже чем в Германии, Аме- рике, канадцев, но выше российских. Поэтому остановимся на факторах, сильно влияющих
на развитие трансплантированных эмбрионов.
Эмбрион должен быть полностью со- зревшим, хорошо развитым желтым телом.
Желтое тело, создает все благоприятные условия, начиная от питательных веществ, не- обходимых для трансплантированного эмбри- она, до сокращения мышц матки.
По некоторым сведениям, отклонение охоты у доноров и реципиентов ±2 суток не оказывает влияние на развитие транспланти- рованных эмбрионов.
В результате исследований на фактиче- ском материале,получены новые, теоретически обоснованные и апробированные в условиях производства данные по морфологии яични- ков и эмбрионов, полученных от коров-доно- ров при индукции полиовуляции,извлечения,
сбора и пересадки эмбрионов.
По результатам проведенных научно-ис- следовательских работ можно сделать следую- щие выводы:
- от 8 доноров путем полиовуляции по- лучено 102 эмбриона, в среднем 12,7 с коровы;
- по морфологической оценке из 102 по- лученных эмбрионов 8,8 % находятся в стадии ранней морулы, 18,6 % – в стадии компактной морулы, 59,8 % – в стадии ранней бластоци- сты, 12,8 % – неоплодотворенные;
- в общем из 102 эмбриона 91,8 % – при- годные к трансплантации, 8,2 % – непригод- ные; - из 34 пересаженных эмбрионов 18 (52,9
%) прижились.
Список литературы
1 Grimes, J. F. Utilizationof Embryo Transferin Beef Cattle. / J. F. Grimes.// Fact sheet. Agriculture and Natural Resources, 2008. – Р. – 5.
2 Stadnik, L. Ovaria nactivity and embryoyiel dinrelation to the post partumperiod insuperovulated dairy cows / L. Stadnik, J. Bezdicek, A. Makarevich, etс. // ActaVeterinaria BRNO. 2017. Vol. 86. No.
1. Pp. 51–57.
3 Looney, C.R. Improving fertility in beef cow recipients. C. R. Looney, J. S. Nelson, H.J.
Schneider, D. W. Forrest. Therlogenology2006 : 65 : 201-209.
4 Mapletoft, J. In vitro and in vivo embryo production in cattle superstimulated with FSH for 7 days. / J. Mapletoft, A. Garcia Guerra, 151 F.C.F. Dias, J. Singh, G. P. Adams // Anim. Reprod., v.12, n.3, Jul./Sept. 2015. - p. 151-388.
5 Махоткин А.Г. Искусственное осеменение сельскохозяйственных жи-вотных и транс- плантация эмбрионов крупного рогатого скота.Методические указания. – 2007. – с.51.
6 Сергеев Н. И., Амарбаев А. М. Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота. – Алма-Ата : «Кайнар», 1987. –160 с.
7 Эрнст Л. К., Сергеев Н. И. Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных.
– М. : «Агропромиздат», 1989. – 302 с.
8 Аятханулы М., Лейдинг К., Ноонер Х-П. Количественное и качественное изучения эм- брионов, полученных от коров-доноров немецкой симментальской породы // – Между. науч.- прак. кофер. – Барнаул АГУ, 2010. – 254 с.
9 Willett E. L., Black W. G., Casida L. E., Stone W. H., Bukner P. J. Successful transplantation of a fertilized bovine ovum. – Science, 1951. – V. 113. – P. 247–248.
10 Аятхан М., Атейхан Б., Сейтеуов Т.К. Результаты изучения морфологии развития эм- брионов от суперовулированных коров и телок симментальской породы // Вестник Государ- ственного университета имени Шакарима.-Семей, 2015. – № 4(72). – С. 211–213.
11 Калимбаева М., Бектауов О. Качество эмбриопродукции у доноров, многократно обра- ботанных гормональным препоратом // Вестник сельскохозяйственой науки. – 2006. – № 8. – С.
43–44.
12 Аятханұлы М., Санжжавын Г. Жануарлардың ұрығын көшіріп отырғызу. – Павлодар- Улан-Батор, 2012. – 40 б.
13 Мадисон В. В., Мадисон Л. В. Трансплантация эмбрионов на службе животноводства //
Зоотехния. – 2005. – № 5. – C. 29–31.
14 Лихоман А.В., Усенко В.В., Пустовая А.О. Результаты внедрение трансплантации эм- брионов крупного рогатого скота. Научный журнал КубГАУ, – № 121(07), 2016 г.
15 Nohner H-P., Leiding C. Biologisches und ökonomisches Potential des Embryotransfers beim Fleckvich // Zuchtwahl und Besamung. – 2004. № 152.– P. 22–26.
16 Gordon I. Problems and prospects in cattle egg transfer. – Irich Vet. J., 1975.–V. 29. – P.
21–62.
17 Hasler J. F., Mk Cauley A. D., Lathrop W. F., Foote R. H. Effect of onor-embryo-resipient interactions on pregnancy rate in a large-scale bovine embryotransfer program. – Theriogenology, 2003.
– P. 1402–1414.
18 Тәжиев Қ. П., Бекенов Д. М. т.б. Ірі қара эмбриондарының жатырда бекуіне және өсуіне әсерін тигізетін кейбір себептер // Жаршы. – 2012. – № 9.– Б. 60–65.
19 Асанов Ж. Б. Приживляемость эмбрионов у крупного рогатого скота в зависимости от иммунологической реакции реципиента // Материалы международной научно-практической конференции «Теория, практика и инновации в животноводстве и кормопроизводстве. – 2013. –
№ 5. – Т. 1. – 165 с.
20 Зимина Е. В Животноводстве экспериментируют с трансплантацией эмбрионов КРС.
[Электронный ресурс], https://m.kapital.kz. Раздел Экономика. (дата обращения07.09.2018).
21 Hahn J., Leiding C. 30 Jahre Embryotransfer. – Besamungsverein Neustadt a.d. Aisch E. V., 2004. – 42 S.
Refences
1 Grimes, J. F. Utilizationof Embryo Transferin Beef Cattle. / J. F. Grimes.// Fact sheet. Agriculture and Natural Resources, 2008. – Р. – 5.
2 Stadnik, L. Ovarianactivity and embryoyieldinrelation to the postpartumperi-odinsuperovulated dairycows / L. Stadnik, J. Bezdicek, A. Makarevich, etс. // ActaVeterinaria BRNO. 2017. Vol. 86. No.
1. P. 51–57.
3 Looney, C.R. Improving fertility in beef cow recipients. C. R. Looney, J. S. Nelson, H.J.
Schneider, D. W. Forrest. Therlogenology2006 : 65 : P.201-209.
4 Mapletoft, J. In vitro and in vivo embryo production in cattle superstimulated with FSH for 7 days. / J. Mapletoft, A. Garcia Guerra, 151 F.C.F. Dias, J. Singh, G. P. Adams // Anim. Reprod., v.12, n.3, Jul./Sept. 2015. - P. 151-388.
5 Mahotkin A.G. Iskusstvennoeosemeneniesel'skohozyajstvennyhzhivotnyhi-transplantaciyaeh mbrionovkrupnogorogatogoskota.Metodicheskieukazaniya. – 2007. – P.51.
6 Sergeev N. I., Amarbaev A. M. Transplantaciya ehmbrionov krupnogo rogatogo skota. – Alma- Ata : «Kajnar», 1987. P. –160
7 Ernst L. K., Sergeev N. I. Transplantaciya ehmbrionov sel'skohozyajstvennyh zhivotnyh. – M.
: «Agropromizdat», 1989. P.– 302
8 Ayatkhanuly M., Leiding K., Nooner H-P. Kolichestvennoe i kachestvennoe izucheniya ehmbrionov, poluchennyh ot korov-donorov nemeckoj simmental'skoj porody // – Mezhdu. nauch.- prak. kofer. – Barnaul AGU, 2010. P. – 254
9 Willett E. L., Black W. G., Casida L. E., Stone W. H., Bukner P. J. Successful transplantation of a fertilized bovine ovum. – Science, 1951. – V. 113. – P. 247–248.
10 Ayatkhan M., Ateihan B., Seiteuov T.K. Rezul'taty izucheniya morfologii razvitiya ehmbrionov ot superovulirovannyh korov i telok simmental'skoj porody // Vestnik Gosudarstvennogo universiteta imeni Shakarima. Semej 2015. – № 4(72). – P. 211–213.
11 Kalimbaeva M., Bektauov O. Kachestvo ehmbrioprodukcii u donorov, mnogokratno obrabotannyh gormonal'nym preporatom // Vestnik sel'skohozyajstvenoj nauki. – 2006. – № 8. – P.
43–44.
12 Ayathanuly M., Sanzhzhavyn G. Zhanuarlardynurygyn koshіrіp otyrgyzu. – Pavlodar- Ulaanbaatar, 2012. P. – 40
13 Madison V. V., Madison L. V. Transplantaciya ehmbrionov na sluzhbe zhivotnovodstva //
Zootekhniya. – 2005. – № 5. – P. 29–31.
14 Lihoman A.V., Usenko V.V., Pustovaya A.O. Rezul'taty vnedrenie transplantacii ehmbrionov krupnogo rogatogo skota. Nauchnyj zhurnal KubGAU, – № 121(07), 2016 g.
15 Nohner H-P., Leiding C. Biologisches und okonomisches Potential des Embryotransfers beim Fleckvich // Zuchtwahl und Besamung. – 2004. № 152.– P. 22–26.
16 Gordon I. Problems and prospects in cattle egg transfer. – Irich Vet. J., 1975.–V. 29. – P.
21–62.
17 Hasler J. F., Mk Cauley A. D., Lathrop W. F., Foote R. H. Effect of donor-embryo-resipient interactions on pregnancy rate in a large-scale bovine embryotransfer program. – Theriogenology, 2003.
– P. 1402–1414.
18 Tazhiev K. P., Bekenov D. M. t.b. Іrі hara ehmbriondarynyn zhatyrda bekuіne zhane osuіne aserіn tigіzetіn kejbіr sebepter // Zharshy. – 2012. – № 9. – B. 60–65 g.
19 Asanov ZH. B. Prizhivlyaemost' ehmbrionov u krupnogo rogatogo skota v zavisimosti ot immunologicheskoj reakcii recipienta // Materialy mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii
«Teoriya, praktika i innovacii v zhivotnovodstve i kormoproizvodstve. – 2013. – № 5. – T. 1. P.– 165.
20 Zimina E. V ZHivotnovodstve ehksperimentiruyut s transplantaciej ehmbrionov KRS.
[EHlektronnyj resurs], https://m.kapital.kz. Razdel EHkonomika. (data obrashcheniya07.09.2018).
21 Hahn J., Leiding C. 30 Jahre Embryotransfer. – Besamungsverein Neustadt a.d. Aisch E. V., 2004. P.– 42.
СОЛТҮСТІК ШЫҒЫС-ҚАЗАҚСТАН ЖАҒДАЙЫНДА МҮЙІЗДІ ІРІ ҚАРА МАЛҒА ЭМБРИОН ТРАНСПЛАНТАЦИЯЛАУ НӘТИЖЕЛЕРІ
Атейхан Б.1, PhD докторант Бексеитов Т.К.2, а/ш.ғ.д., профессор Қажгалиев Н.Ж.1, а/ш.ғ.к., доцент Сейтеуов Т.Қ.2, PhD доктор Кайниденов Н.Н.2, магистр Касенов Е.К.2, магистр
1С. Сейфуллин атындағы Қазақ агротехникалық университеті, Жеңіс даңғ. 62 Нұр-Сұлтан қ., 010011, Қазақстан
2С. Торайғыроватындағы Павлодар мемлекеттік университеті, Ломов көшесі, 64 Павлодар қ., 140008, Қазақстан Түйін
Бұл мақалада мүйізді ірі қара малға эмбрион трансплантациялаудың маңыздылығы және Солтүстік-шығыс Қазақстан жағдайында өсірілетін етті-сүтті бағыттағы симментал тұқымының донор-сиырларына суперовуляция түзілтіру арқылы эмбрион шайып алу, эмбриондардың морфологиялық даму сатыларын бағалау және жарамды эмбриондарды реципиент-құнажындарға жаңа шайылып алынған күйінде трансплантациялау нәтижелері жайында айтылған.
Сонымен қатар эмбриондарды алу әдістері, олардың сапасын бағалау, донор-сиыр- лардан алынған эмбриондардың морфологиясы мен даму жылдамдықтары арасындағы айырмашылықтары анықталған және шет мемлекеттер мен елімізде осы салада жүргізілген нәтижелер салыстырған. Трансплантацияланған эмбриондардың реципиент құрсағында дамуы- на әртүрлі факторлар әсер ететіні жайы да сөз болған. Донор аналықтан көп эмбрион алу мен реципиент аналықа трансплантацияланған эмбриондардың жатырда беку пайызын арттыру үшін қан құрамындағы кейбір гормондардың үлесін анықтауы жайлары да жазылған.
Кілтті сөздер: эмбрион, ірі қара мал, бластоциста, морула, трансплантация, гормондар, жұмыртқалықтар, донор-сиыр, реципиент.
THE RESULTS OF EMBRYO TRANSFER IN CATTLE IN NORTH-EASTERN KAZAKHSTAN
Ateikhan B.1, PhD student Bekseitov T.K.2, doctor of agricultural sciences, professor Kazhgaleyev N.Zh.1, candidate of agricultural sciences, associate professor
Seyteuov T.K.2, doctor. PhD, associate professor Kainidenov N.N.2, master Kasenov E.K.2, master
1JSC «S.Seifullin Kazakh Agrotechnical University», Zhenis avenue, 62 Nur-Sultan city, 010011, Kazakhstan
2Pavlodar State University named after Sultanmakhmud Toraigyrov, Lomov street 64 Pavlodar, 140008,Kazakhstan Summary
The article identifies the influence of method of induction of polyovulation in cows-donors, providing prolongation of the action of follicle-stimulating hormone preparations on ovarian morphology and quality of embryos confirmed by physiology, minimally invasive, the economic feasibility of methods of induction of polyovulation using extenders in cows-donors, as well as methods of extraction, quality assessment and embryo transfer.
The criteria of selection of donor cows and recipients taking into account their physiological state, the state of the reproductive system, the functional activity of the ovaries in response to the action of hormones. Differences in the morphology and development rate of embryos obtained from donor cows of the Simmental breed were revealed. The results obtained allow us to conclude that the use of embryo transplantation in dairy cattle in a short time will dramatically increase the number of highly productive herd, thereby realizing the full genetic potential.
Keyword: embryo, cattle,blastocyst, morula, transplantation, hormones, ovaries, cow-donor, recipient.
УДК633.85:632.913(574)(045)
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ФИТОСАНИТАРНОЙ ТЕХНОЛОГИИ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ ЛЬНА МАСЛИЧНОГО (Linumusitatissimum L.) В УСЛОВИЯХ ЛЕСОСТЕПНОЙ
ЗОНЫ СЕВЕРНОГО КАЗАХСТАНА
Садыков Б.С., к.с.-х.н.
Турганбаев Т.А., к.с.-х.н.
Байбусенов К.С., доктор философии PhD Яцюк С.В., к.с.-х.н.
Казахский агротехнический университет им. С.Сейфуллина, пр. Жеңіс, 62, г. Нур-Султан, 010011, Казахстан, [email protected] Аннотация
В статье дана оценка фитосанитарного состояния посевов льна масличного в условиях лесостепной зоны Северного Казахстана. Уточнен видовой состав вредителей и болезней, их биологические особенности и вредоносность. Испытан защитно-стимулирующий препаратбио- логического происхождения Альбит, способный защитить растения от широкого круга стрессов, механических повреждений, дефицита элементов питания и т.д. Проведена сравнительная оцен- ка обработки семян химическимпротравителем и биопрепаратом Альбит. Определена эффектив- ность комплексных обработок химическимии биологическими препаратами против вредителей и болезней.
Ключевые слова: лен масличный, вредители, болезни, инсектициды, фунгициды, монито- ринг, протравливание, эффективность, урожайность.
Введение
Масличный лён культура для много- стороннего использования, является хорошей предшествующей культурой и имеет высокий уровень рентабельности для сельского хозяй- ства. Продуктами переработки льна являются масло, жмых и шрот. В маслосеменах льна содержится до 50% масла. Льняное масло ис- пользуется в разной промышленности, для производства красок, мыла, кожи, бумаги и алюминия. Шрот и жмых – важные концентри- рованные корма для животных [1-3].
По литературным источникам [4-5], регионами происхождения льна масличного (Linumusitatissimum L.) является страны сред- неземноморья и Азии. Республика Казахстан начала поставлять маслосемена льна в другие страны, и на сегодняшний день занимает тре- тье место в мире по экспорту [6].
В Республике Казахстан основными ре- гионами возделывания льна масличного яв- ляются Северный и Западный Казахстан. Так как культура для Казахстана сравнительно молодая, малоизученными остаются вопросы биологических особенностей видового соста- ва возбудителей болезней и вредителей льна масличного. Не оптимизированы для зоны Северного Казахстана фитосанитарные тех-
нологии. В странах Европы, а также в Китае специфические болезни и вредители льна мас- личного считаются проблемой еще с конца XX века. К примеру, во Франции ежегодно от бо- лезней и вредителей теряется порядком от 10 до 90 % урожая льна [2], что показывает необ- ходимость своевременной защиты растений от вредных организмов.
Фитосанитарная стабилизация льновод- ства может быть достигнута подбором таких мер защиты от болезней, вредителей и сор- няков, которые не нарушая природных взаи- мосвязей живых организмов агроэкосистемы, содействуют саморегуляции агробиоценоза.
Обеспечить сочетание эффективности и эко- логичности фитосанитарного контроля может применение биологических препаратов [7]. По распространённости и возможности причине- ния экономически ощутимого вреда в Север- ном Казахстане занимают широко известные в мировой практики болезни, как фузариоз (FusariumoxysporumSchl. f. lini (Bilai), антрак- ноз (ColletotrichumliniMannsetBolley), бактери- оз (ClostridiummaceransSchard.), альтернари- оз (AlternarialinicolaGlov.etScolko), ржавчина (Melamsporalini (Scum) Desm.).Извредителей –льняные блошки (Aphthonaeuphorbiae– синяя,
A.Flaviceps– коричневая, Longitarsusparvulus–
черная), льняной трипс (Thripslinarius), льня- ная плодожорка (Phaloniaepilinana), совка- гамма (Autographagamma) [1-2, 6].
Вредители и болезни льна способны зна- чительно снизить урожай культуры. Согласно различным источникам [8-10], не химическим способом борьбы против вредных организмов на посевах льна считается севооборот, унич- тожение растительных остатков, использо- вание здоровых семян и устойчивых сортов.
Тем не менее, в мировой практике по борьбе с болезнями льна больше применим метод протравливания семян перед посадкой. Более распространенными препаратами считаются
препараты с такими действующими вещества- ми как quintozene, carbendazim, tri-adimefon, tiuram, ziram, thiophanate-methyl. Против вре- дителей широкое применение нашли препара- ты с вариацией действующих веществ, таких как deltamethrin или dichlorvos. В Казахстане остро стоит вопрос о недостаточности ассор- тимента фунгицидов и инсектицидов заре- гистрированных встране, только один препа- рат «Оптимо 20%» (0,6 л/га), и протравители семян: «Витавакс» (1,5-2,0 л/т), «Ламадор»
(0,12-0,15 л/т), «Редиго-про» (0,35-0,45 л/т),
«Селест-топ 312,5» (1,0-2,0 л/т) (для стимуля- ции и регуляции роста) разрешены к примене- нию.
Материалы и методы
Изучение видового состава вредите- лей и болезней льна масличного, разработ- ка мер борьбы проводились с 2015 по 2018 годы на посевах льна масличного в условиях СХП «Акылбай»Акмолинской области, что относится к лесостепной зоне Северного Ка- захстана. Учеты численности вредителей и пораженности болезнями проводили по обще- признанным методикам [11].В схеме опытов по оценке эффективности применяемых хи- мических и биологических препаратов про- тив вредителей и болезней льна масличного из протравителей семян были применены препа- раты –Селест Топ 312,5 к.с. и Альбит, ТПС, 0,1 кг/т, из фунгицидов – препарат Оптимо 20%
к.э.0,6 л/га, и изинсектицидов – препараты Да- надимПауер, к.э. с нормой расхода 0,15 л/га и КаратэЗеон 050 с.к. с нормой расхода 0,15 л/га.
Стоит учесть, что Альбит был применен
как в качестве протравителя семян, так и в ка- честве препарата для опрыскивания растений по вегетации. Альбит – первый антидот биоло- гического происхождения в практике земледе- лия. В составе препарата содержатся очищен- ные грунтовые бактерии Bacillusmegaterium и Pseudomonasaureofaciens, а также терпеновые кислоты и необходимые для питания корневой системы растений макро- и микроэлементы.
Благодаря такому сбалансированному набо- ру составляющих «Альбит» оправдывает свое многофункциональное назначение. В отличие от аналогов, Альбит способен защитить рас- тения от различных стрессов: засухи и повы- шенных температур, пониженных температур и заморозков, пестицидного стресса, механи- ческих повреждений (град), переувлажнения, загрязнения почвы, дефицита элементов пита- ния [7].
В защите льна масличного особое внима- ние уделяется предпосевной обработке семян.
Перед протравливанием проводили фитопато- логический анализ семян на наличие возбуди- телей болезней. Проведённый микологический анализ семян льна масличного показал, что се- менной материал, является еще одним источни- ком передачи основных возбудителей болезней льна. В результате фитопатологического ана- лиза выявлена заражённость семян льна мас- личного возбудителями AlternarialinicolaGlov.
и FusariumoxysporumSchecht. f. lini. (таблица
1). Симптомы болезни обычно начинаются в виде маленьких, круглых и темных пятен. По мере прогрессирования болезни, круглые, се- рые или черные пятна могут увеличиваться до
½ дюйма (1 см). Болезнь вредит на всех ста- диях роста и развития льна, в том числе семян.
Сразу после прорастания семян, может приве- сти к увяданию растений [12].
В таблицы 1 приведены данные по за- раженности семян льна масличного грибными болезнями.
Результаты исследований и их обсуждение
Таблица 1 – Заражённость семян льна масличного грибными болезнями (в среднем за 2015-2018 гг.)
Вариант Процент
зараженных
семян F.oxysporum A. linicola Плесневение сорт Северный
Селест Топ 312,5 к.с. 5,5 3,0 4,0 -
Альбит, ТПС, 0,1 кг/т 4,0 2,0 2,0 -
Контроль (без обработки) 38,5 18,5 16,0 2,6
сорт Кустанайский янтарь
Селест Топ 312,5 к.с. 6,0 6,0 2,0 -
Альбит, ТПС, 0,1 кг/т 4,0 1,0 3,0 -
Контроль (без обработки) 62,0 35,0 22,0 5,0
Результаты показывают, что общая за- ражённость семян на изучаемом сорте Ку- станайский янтарь была выше, чем на сорте Северный, и составила соответственно 62,0 и 52,0%. Была также отмечена разница в степени зараженности изучаемых сортов льна различ- ными видами семенной микрофлоры. Семена льна масличного сорта Кустанайский янтарь были сильнее поражены фузариозом – 35,0%, в то время как сорт Северный на 21,0%. Из се- менной инфекции на обоих сортах доминиро- вали грибы рода AlternarialinicolaGlov(22,0%
- 21,0% соответственно).
При изучении влияния предпосевной обработки семян на заражённость болезня- ми, отмечены наличие грибов рода Alternaria, Fusarium. Все варианты поражались см