№ 1 2023

«3 : intellect ,idea ,innovation – èíòåëëåêò ,èäåÿ ,èííîâàöèÿ» i № 1 20 2 3

3 ⁱ

МНОГОПРОФИЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЖУРНАЛ

КӨПСАЛАЛЫ ҒЫЛЫМИ ЖУРНАЛЫ

№ 1 2023

Қостанай өңірлік университеті

Костанайский региональный университет Костанайский региональный университет имени Ахмета Байтурсынова

имени Ахмета Байтурсынова

Костанайский региональный университет имени Ахмета Байтурсынова

UNIVERSITY

Қостанай өңірлік университеті

КӨПСАЛАЛЫ

ҒЫЛЫМИ ЖУРНАЛЫ МНОГОПРОФИЛЬНЫЙ

НАУЧНЫЙ ЖУРНАЛ

Наурыз (март)

№1 2023

№ 1 март 2023 г.

Жылына төрт рет шығады Выходит 4 раза в год

А. Байтұрсынов атындағы Қостанай өңірлік университетінің көпсалалы ғылыми журналы Многопрофильный научный журнал Костанайского регионального университета им. А. Байтурсынова

Меншік иесі:

А. Байтұрсынов атындағы Қостанай өңірлік университеті Собственник:

Костанайский региональный университет им. А. Байтурсынова Бас редакторы / Главный редактор:

Куанышбаев С. Б., география ғылымдарының докторы / доктор географических наук Бас редактордың орынбасары / Заместитель главного редактора:

Жарлыгасов Ж.Б., ауыл шаруашылығы ғылымдарының кандидаты / кандидат сельскохозяйственных наук Редакциялық кеңес / Редакционный совет:

1. Абиль Е.А. – тарих ғылымдарының докторы/доктор исторических наук

2. Айтмұхамбетов А. А. – тарих ғылымдарының докторы / доктор исторических наук 3. Атанов С.К. – техника ғылымдарыңың докторы /доктор технических наук

4. Ахметова Б. З. – филология ғылымдарының кандидаты / кандидат филологических наук 5. Бекмагамбетов А.Б. – заң ғылымдарының кандидаты / кандидат юридических наук

6. Бережнова Е. В. – педагогика ғылымдарының докторы / доктор педагогических наук (Российская Федерация) 7. Брагина Т.М. – биология ғылымдарының докторы / доктор биологических наук

8. Важев В.В. – химия ғылымдарының докторы /доктор химических наук (по компьютерное моделирование) 9. Ким Н.П. – педагогика ғылымдарының докторы /доктор педагогических наук

10. Классен В. И. – техника ғылымдарыңың докторы /доктор технических наук (Российская Федерация) 11. Козаченко И. Я. – заң ғылымдарының докторы /доктор юридических наук (Российская Федерация) 12. Логвин А. В. – тарих ғылымдарының / кандидат исторических наук

13. Лозовицка Б. – PhD докторы/ доктор PhD (Польша)

14. Маслова В. А. – филология ғылымдарының докторы/доктор филологических наук (Беларусь) 15. Медетов Н.А. – техника ғылымдарының докторы /доктор технических наук

16. Михайлов Ю. Е. – биология ғылымдарының докторы / доктор биологических наук (Российская Федерация) 17. Одабас М. – ауыл шаруашылығы ғылымдарының докторы /доктор сельскохозяйственных наук (Турция) 18. Пантелеенко Ф. И. – техника ғылымдарыңың докторы /доктор технических наук (Республика Беларусь) 19. Рыщанова Р.М. – ветеринария ғылымдарының кандидаты / кандидат ветеринарных наук

20. Шайкамал Г.И. – ауыл шаруашылығы ғылымдарының кандидаты / кандидат сельскохозяйственных наук 21. Санду И. С. – экономика ғылымдарының докторы /доктор экономических наук (Российская Федерация) 22. Сипосова М. – PhD докторы / доктор PhD (Словакия)

23. Татмышевский К. В. – техника ғылымдарының докторы /доктор технических наук (Росийская Федерация) 24. Тугужекова В.Н. – тарих ғылымдарының докторы/доктор исторических наук (Хакассия, Российская Федерация)

Редакциялық кеңесінің хатшысы / Секретарь редакционного совета – Шалгимбекова К.С., педагогика ғылымдарының кандидаты / кандидат педагогических наук

Журнал 2000 ж. бастап шығады. 29.10.2020 ж. Қазақстан Республикасының мəдениет жəне ақпарат министрлігінде қайта тіркелген. № KZ27VPY00028449 куəлігі. / Журнал выходит с 2000 г. Перерегистрирован в Министерстве культуры и информации Республики Казахстан 29.10.2020 г. Свидетельство № KZ27VPY00028449

А.Байтұрсынов атындағы ҚӨУ-дің 18.03.2022ж №104 «3i: intellect, idea, innovation - интеллект, идея, инновация» Қазақстан Республикасы Білім жəне ғылым министрлігінің Білім жəне ғылым саласында сапаны қамтамасыз ету комитеті алқасының шешімімен 06.00.00-Ауылшаруашылық ғылымдары жəне 16.00.00-Ветеринариялық ғылымдар салалары бойынша диссертацияның негізгі нəтижелерін жариялау үшін ұсынылған ғылыми басылымдар тізіміне кірді./Решением Коллегии Комитета по обеспечению качества в сфере образования и науки Республики Казахстан №104 от 18.03.2022 г. журнал КГУ им.

А. Байтурсынова «3i: intellect, idea, innovation - интеллект, идея, инновация» включен в Перечень научных изданий, рекомендуемых для публикации основных результатов диссертаций по отраслям: 06.00.00-Сельскохозяйственные науки и 16.00.00-Ветеринарные науки.

2012 ж. аталмыш журнал ISSN (ЮНЕСКО, г. Париж, Франция) сериялық басылымдарды тіркеу жөніндегі халықаралық орталығында тіркеліп, ISSN 2226-6070 халықаралық нөмірі берілді./Журнал в 2012 г. зарегистрирован в Международном центре по регистрации сериальных изданий ISSN (ЮНЕСКО, г. Париж, Франция), присвоен международный номер ISSN 2226-6070.

Авторлардың пікірлері редакцияның көзқарасымен сəйкес келе бермейді. Қолжазбаларға рецензия берілмейді жəне қайтарылмайды. Ұсынылған материалдардың дұрыстығына автор жауапты. Қайта басылған материалдарды журналға сүйеніп шығару міндетті. / Мнение авторов не всегда отражает точку зрения редакции. За достоверность предоставленных материалов ответственность несет автор. При перепечатке материалов ссылка на журнал обязательна.

© А. Байтұрсынов атындағы Қостанай өңірлік университеті

© Костанайский региональный университет им. А. Байтурсынова

УДК 619:616.98:578.834:115 МРНТИ 68.41.53

DOI: 10.52269/22266070_2023_1_3

ЭТИОПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ЛЕПТОСПИРОЗЕ

Киркимбаева Ж.С^*. – доктор ветеринарных наук, профессор, зав.кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии Казахского национального аграрного исследовательского универси- тета, г. Алматы.

Бияшев Б.К. – доктор ветеринарных наук, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Казахского национального аграрного исследовательского университета, г. Алматы.

Ермагамбетова С.Е – кандидат ветеринарных наук, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Казахского национального аграрного исследовательского универси- тета, г. Алматы.

Сарыбаева Д.А. – PhD, ассоциированный профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Казахского национального аграрного исследовательского университета, г. Алматы.

В данной работе представлены результаты исследования клинической картины, патоло- гоанатомических изменений, морфологических и биохимических показателей крови у крупного рогатого скота при лептоспирозе. Установлено, что заболевание характеризуется развитием анемии и хронического воспалительного процесса и сопровождается снижением у животных уровня гемоглобина до 120,6±5,4 г/л, эритроцитов до 4,61±0,39 млн/мкл, и увеличением скорости оседания эритроцитов до 2,5-4,0 мм/ч. Из биохимических показателей отмечается понижение общего белка составило 70,5±1,1 г/л, увеличение уровня АЛТ и АСТ до 98,59±3,2 и 167,75±8,8 ЕД/л соответственно, повышение уровня общего билирубина 21,95±1,08 мкмоль/л, так же происходит увеличение креатинина до 142,21±8,3 мкмоль/л и мочевины до 21,71±0,33 ммоль/л. Полученные результаты подтверждают предыдущие данные ученых, описавших в своих статьях патологи- ческие процессы, возникающие при лептоспирозе. Рост количества печеночных ферментов вероятно связано с выделением лептоспирами гемолитических токсинов, а увеличение уровня билирубина указывает на повреждение желчных протоков. Такие изменения являются следствием развития в организме больного животного этиопатогенеза, вызванного факторами патоген- ности лептоспир и обуславливают специфическую для данного заболевания патолого-анато- мическую картину, характеризующуюся анемией, гемоглобинурией и желтушностью слизистых оболочек и кожи.

Ключевые слова: лептоспироз, кровь, гематология, патогенез, анемия, гемаглобинурия, желтуха.

ETHIOPATHOGENETIC CHANGES IN THE BLOOD OF CATTLE CAUSED BY LEPTOSPIROSIS Kirkimbaeva Zh.S.^* – Doctor of Veterinary Sciences, Professor, Head of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Kazakh National Agrarian Research University, Almaty.

Biyashev B.K. – Doctor of Veterinary Sciences, Professor of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Kazakh National Agrarian Research University, Almaty.

Ermagambetova S.E. – Candidate of Veterinary Sciences, Professor of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Kazakh National Agrarian Research University, Almaty.

Sarybayeva D.A. – PhD, Associate Professor, of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Kazakh National Agrarian Research University, Almaty.

This paper presents the results of a study of the clinical picture, pathoanatomical changes, morphological and biochemical blood parameters in cattle with leptospirosis.It was established that the disease is characterized by the development of anemia and a chronic inflammatory process and is accompanied by a decrease in the level of hemoglobin in animals to 120.6±5.4 g/l, erythrocytes to 4.61±0.39 million/μl, and an increase in the erythrocyte sedimentation rate to 2 .5-4.0 mm/h From the biochemical parameters there was a decrease in total protein which was 70,5±1,1 g/l, an increase in ALT and AST to 98,59±3,2 and 167,75±8,8 units/l respectively, an increase in total bilirubin 21,95±1,08 μmol/l, as well as an increase in creatinine to 142,21±8,3 μmol/l and urea to 21,71±0,33 mmol/l. The results obtained confirm the previous data of scientists who have described in their articles the pathological processes occurring in leptospirosis An increase in liver enzymes is probably related to the release of hemolytic toxins by leptospira, and an increase in bilirubin levels indicates damage to the bile ducts. Such changes are a consequence of the development in the body of a sick animal of etiopathogenesis caused by pathogenicity factors of

leptospira and cause a specific pathological and anatomical picture for this disease, characterized by anemia, hemoglobinuria and yellowness of the mucous membranes and skin.

Key words: leptospirosis, blood, hematology, pathogenesis, anemia, hemaglobinuria, jaundice.

ЛЕПТОСПИРОЗ КЕЗІНДЕГІ ІРІ ҚАРА МАЛ ҚАНЫНДАҒЫ ЭТИОПАТОГЕНЕТИКАЛЫҚ ӨЗГЕРІСТЕР

Киркімбаева Ж.С.^* – ветеринария ғылымдарының докторы, профессор, Қазақ ұлттық аграр- лық зерттеу университетінің микробиология, вирусология жəне иммунология кафедрасының меңгерушісі, Алматы қ.

Бияшев Б.Қ. – ветеринария ғылымдарының докторы, Қазақ ұлттық аграрлық зерттеу уни- верситетінің микробиология, вирусология жəне иммунология кафедрасының профессоры, Алматы қ.

Ермагамбетова С.Е. – ветеринария ғылымдарының кандидаты, Қазақ ұлттық аграрлық зерттеу университетінің микробиология, вирусология жəне иммунология кафедрасының профес- соры, Алматы қ.

Сарыбаева Д.А. – PhD докторы, Қазақ ұлттық аграрлық зерттеу университетінің микробиология, вирусология жəне иммунология кафедрасының қауым профессоры, Алматы қ.

Бұл жұмыста лептоспирозбен ауыратын малдың клиникалық көрінісін, патоанатомиялық өзгерістерін, қанның морфологиялық жəне биохимиялық көрсеткіштерін зерттеу нəтижелері берілген.

Ауырған жануарларда анемияның жəне созылмалы қабыну процесінің дамуымен сипатталатыны жəне гемоглобин деңгейінің 120,6±5,4 г/л-ге дейін, эритроциттер деңгейінің 4,61±0,39 млн/мкл-ге дейін төмендеуі, эритроциттердің шөгу жылдамдығының 2 ,5-4,0 мм/сағ дейін жоғарылауы анықталды. Био- химиялық көрсеткіштерден жалпы белоктың 70,5±1,1 г/л төмендеуі, АЛТ жəне АСТ деңгейінің сəйкесінше 98,59±3,2 жəне 167,75±8,8 бр/л-ге дейін жоғарылауы, жалпы билирубин 21 ,95±1,08 мкмоль/л, сонымен қатар креатининнің 142,21±8,3 мкмоль/л дейін жəне несептің 21,71±0,33 ммоль/л дейін жоғарылауы байқалады. Алынған нəтижелер лептоспирозда болатын патологиялық процестерді ғылыми жұмыстарда сипаттаған ғалымдардың деректерін растайды. Бауыр ферменттерінің санының артуы лептоспира арқылы гемолитикалық токсиндердің бөлінуімен байланысты болуы мүмкін, ал билирубин деңгейінің жоғарылауы өт жолдарының зақымдалуын көрсетеді. Мұндай өзгерістер лептоспиралардың патогендік факторларынан туындаған этиопатогенездегі ауру жануардың организ- мінде дамуының салдары болып табылады жəне анемиямен, гемоглобинуриямен жəне шырышты қабықтардың жəне терінің сарғаюымен сипатталатын осы ауру үшін ерекше патологиялық- анатомиялық көріністі тудырады.

Түйінді сөздер: лептоспироз, қан, гематология, патогенез, анемия, гемаглобинурия, сарғаю.

Введение

Проблеме лептоспироза животных уделено и уделяется большое внимание. Заболевание регистрируют во многих странах мира, а его распространенность наиболее изучено в Европе, Америке, Австралии, Великобритании, России и в ряде других странах [1, с. 3].

Восприимчивость различных видов животных к лептоспирозной инфекции неодинакова, болеют животные всех возрастных групп, но чаще и более тяжело заболевание регистрируется среди молодняка.

В естественных условиях лептоспирозу подвержены чаще свиньи и крупный рогатый скот [2, с.13].

На сегодняшний день, когда в хозяйствах содержатся несколько видов животных и при соот- ветствующих условиях для распространения болезни, возбудитель лептоспироза могут переходить с одного вида животного на другого, т.е. существует межвидовое заражение [3, с. 124].

Основной эпизоотологической особенностью лептоспироза сельскохозяйственных животных является преобладание бессимптомных форм инфекции в виде лептоспироносительства, которые способствуют возникновению и распространению болезни, являясь в стаде скрытыми носителями, а также обитание на фермах грызунов – резервуара лептоспир, бесконтрольное перемещение живот- ных, ввод новых особей без исследования на лептоспироз, несоблюдение режима профилактической вакцинации и ревакцинации [4, с. 15].

Лептоспирозу свойственна некоторая сезонность, хотя отдельные случаи заболевания возмож- ны на протяжении всего года. Чаще лептоспироз у животных проявляется в летне-осенний период, когда проводится поение животных из открытых водоемов со стоячей водой или при выпасе на заболоченных участках земли [4, с. 16]. Многочисленные исследования показали, что последствия сильных дождей вызывают массовые вспышки лептоспироза, так как лептоспиры попадают в пресно- водные водоемы, ручьи, загрязняя воду и прилегающую к ним почву, в результате чего заражаются люди и животные [5, с. 68].

Лептоспироз проявляется в виде небольших эпизоотий и спорадических случаев [6, с. 7]. В вначале заболевания в течение 5-10 дней заболевает небольшое количество животных, затем вспышка купируется, но через несколько дней начинается новая волна вспышек. Это объясняется с накоплением возбудителя во внешней среде, так как длительность паузы между вспышками пример- но равна инкубационному периоду. Другая особенность эпизоотии заключается в том, что она не охватывает все поголовье или даже подавляющую часть стада. Это свидетельствует о значительной иммунной прослойке среди животных [7, с. 86].

Многие исследователи предполагают, что при попадании лептоспир во внешнюю среду происходит не механическое и случайное отмирание лептоспир, а их избирательная элиминация из гетерогенной среды. Направления селекции лептоспир в организме животного и во внешней среде соответствуют разным свойствам этих сред обитания. В результате неизбежны различия между «организменной» и

«внеорганизменной» частями популяции лептоспир [8, с. 5].

Растущее число исследований продемонстрировало выживаемость патогенных лептоспир в окружающей среде и соответственно рост факторов риска вовлечения в инфекционный процесс ранее благополучных территорий [9, с. 43]. Так, с 1999 г. по 2019 г. по данным статистики Алтайский край был благополучен по лептоспирозу, однако в 2020-2021 гг., произошла вспышка, в результате чего вновь выявлено 9 неблагополучных пунктов по лептоспирозу крупного рогатого скота и лошадей.

Анализ исследователей определил основные причины возникновения вспышки – это теплый влажный климат, большое количество света и тепла, повышенный уровень атмосферных осадков, наличие большего количества мышевидных грызунов, которые являются природными резервуарами возбудителя лептоспироза [10, с. 53]. Краснодарском крае также доминирующими носителями L.

interrhogans в природных очагах являются грызуны: мышь полевая (38,5-42,5 %), малая кавказская лесная мышь, кавказская лесная мышь, полёвка кустарниковая, роль серой крысы значительно снизилась.

На сегодняшний день недостаточно изучен патогенез лептоспироза. Гены, кодирующие факто- ры вирулентности лептоспир, не имеют гомологов в сравнении с другими видами бактерий [11, с. 11].

Поэтому при сравнении факторов патогенности лептоспир с другими патогенными микроорганизмами, они отличаются, из-за значительного филогенетического расстояния. В патогенезе лептоспир боль- шое значение имеет внутриклеточная фаза развития, хотя лептоспиры не являются внутриклеточны- ми патогенами. Ряд исследователей экспериментально in vitro доказали способность лептоспир к про- никновению в клетки и ткани пораженного органа и к их персистенции в макрофагах [12, с. 388].

Исследователи из Техаса установили, что единственным клиническим признаком при хроническом лептоспирозе являются аборты, однако уровень проявления абортов в стаде часто зависит от штам- мов лептоспир. Так, менее 10% абортов наблюдается при инфицировании сероваром Hardjo, тогда как при заражении сероваром Pomona этот показатель составляет 50% [13]. Аналогичные результаты по этиологии абортов у свиней, вызванных серогруппой Pomona, получены учеными Италии [14, с.

332].

При молекулярной диагностике с помощью филогенеза lfb1 было установлено, что источником лептоспирозного аборта могут быть генетически разнообразные штаммы [15, с. 413]. В Бельгии для лучшего понимания патогенеза лептоспироза крупного рогатого скота, были проведены всесторонние исследования с описанием патологоанатомических изменений, результатами серологических, моле- кулярно-генетических тестов при абортах, зарегистрированных у коров. При этом установили влияние определенных сероваров лептоспир, адаптированных к конкретным животным, на проявление у коров абортов с желтушной и безжелтушной формой лептоспироза. Серологическими и молекулярно-гене- тическими исследованиями были подтверждены два основных геномовида лептоспир, ответственных за аборты – это L. interrogans и L. kirschneri [16, с. 125].

В 2014 году Delooz L., и др., путем сопоставления генетических видов лептоспир подтвердили серологическую реактивность серогрупп Grippotyphosa и Australis при аборте крупного рогатого скота.

[17, с. 161]. В то же время необходимо отметить, что клинические признаки лептоспироза у животных, как у человека очень вариабельны, и большинство случаев связаны с гостальной специфичностью возбудителей. Так, например, Canicola – у собак, Bratislava – у лошадей, Hardjo у крупного рогатого скота и др. [18, С. 2-6]. Однако, по результатам исследований лептоспироза свиней в течение 15 лет (2002-2016г.г.) с помощью теста РМА с последующей идентификацией выделенных культур в ПЦР, Bertelloni F. и др. была определена этиологическая структура с более широким спектром в популяции свиней. Основными серогруппами лептоспир, поражающих свиней, явились Australis, Pomona, Tarassovi, Icterohaemorrhagiae [19, С. 14-22].

Актуальность изучения лептоспироза домашних и диких животных возрастает во всем мире из- за участившихся вспышек среди населения земли. Более высокая заболеваемость наблюдается в тропических странах, в связи с чем Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) определила лептоспироз как тропическое заболевание, которое требует дальнейших исследований в этих странах

[20, с. 332]. К тому же растет риск заражения лептоспирозной инфекцией людей из-за популярности отдыха в тропических странах, развитием туризма и водных видов спорта [21, С. 93-100].

В результате глобального изменения экологической системы, миграции животных и постоянного увеличения числа вовлеченных в эпизоотический процесс разных видов животных, повышения возможностей контакта между дикими и домашними животными, усиливается внимание к эпидемио- логии лептоспироза. Об этом свидетельствует исследования многих ученых разных стран [22,23].

Определяются территории по заболеваемости лептоспирозами на эндемичные страны с высокими, средними и низкими показателями заболеваемости [24, С. 118-125].

Анализ архивных данных глубиной почти в 60 лет (1962–2020 гг) по исследованию сывороток крови больных лептоспирозом людей в реакции микроагглютинации (РМА), проведенный российскими исследователями показал, что значительную роль в этиологической структуре лептоспироза людей играют лептоспиры серогруппы Grippotyphosa (25,1%), у которых отмечается наличие широкого круга резервуаров животных в окружающей среде [25, С. 875-890].

В Казахстане ученые провели большую работу в изучении лептоспироза животных, получены данные о распространении определенных серогрупп лептоспир среди животных различных регионов страны и разработаны меры борьбы [26,27].

Однако, вопросы ветеринарного и социального значения лептоспироза в Казахстане все же недооцениваются и требуют дальнейшего углубленного исследования. В связи с изменением эколо- гии и «гостальной» специфичности возбудителя возможно изменение комплекса взаимоотношения

«патоген-восприимчивый организм» и, соответственно, патологических процессов в организме под воздействием факторов патогенности лептоспир, что явилось задачей настоящих исследований.

Методы и принципы исследования

Наши исследования проводились в период с 2021 г. по 2022 г. на кафедре микробиологии, ви- русологии и иммунологии Казахского национального аграрного исследовательского университета и хозяйствах Алматинской области.

Всего исследовано 37 голов КРС с клиническими признаками лептоспироза. Пробы доставлены из хозяйств Алматинской области Уйгурского и Талгарского районов. 1 труп и 1 вынужденно убитое животное было подвергнуто патологоанатомическому исследованию.

Методологической основой научной работы послужили труды отечественных и зарубежных исследователей в области инфекционных болезней, в частности лептоспироза животных. Исследова- ние гематологических особенностей выполнено по принципу изучения картины крови больных лепто- спирозом животных (КРС), с использованием клинических, лабораторных и статистических методов исследования [28].

При взятии крови соблюдали правила асептики и антисептики. Место взятия пробы крови тщательно выстригали и протирали ватным тампоном, смоченным спиртом. Забор крови у животных получали во время повышения температуры тела.

Для морфологического исследования брали несколько капель крови, поэтому у крупного рога- того скота, забор крови проводили из краевой ушной вены в вакуумные пробирки для гематологии.

Морфологические и биохимические показатели крови определяли на полуавтоматических гематологических анализаторах «DF50 Vet» и «ClimaMC-15».

При морфологическом исследовании крови определяли: уровень лейкоцитов и лейкограмму (нейтрофилы палочкоядерные и сегментоядерные, базофилы, эозинофилы, моноциты и лимфоциты), эритроцитов, гемоглобина.

Для определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ) использовали общепринятый принцип микрометода Панченкова.

При проведении биохимического исследования крови определяли уровень общего белка, моче- вины, креатинина, общего билирубина, глюкозы, активность аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ), щелочной фосфатазы, гематокрита.

Серологические исследования проводились постановкой реакции микроагглютинации (РМА) в соответствии с с ГОСТом 25386-91 – Животные сельскохозяйственные животные. Методы лаборатор- ной диагностики лептоспироза.

Основные результаты

В период 2021-2022 года происследовано серологически в РМА 3344 голов крупного рогатого скота. Из них 219 оказались серопозитивными, что составило 6,54%. Несмотря на наличие антител в крови у животных, во многих хозяйствах клинических форм лептоспироза не наблюдали. Необходимо отметить, что в большей степени лептоспироз в республике протекает в бессимптомной форме, либо в виде иммунизирующей субинфекции. Однако в некоторых случаях отмечались клинические формы лептоспироза, сопровождающиеся у КРС лихорадкой, гематоурией, истощением животных. Для изу- чения и анализа этиопатогенеза лептоспироза нами проведены исследования клиники, гематоло- гических показателей и патологоанатомических изменений при лептоспирозе крупного рогатого скота.

Для морфологических и биохимических исследований брали кровь у 27 голов крупного рогатого скота с острым клиническим и хроническим течением болезни.

В августе 2021 года к нам доставлены пробы патологического материала, сыворотки крови и цельная кровь из Алматинской области, Уйгурского района, с. Таскарасу, КХ «Молдарахым». Прове- дено исследование патологического материала от павших животных и крови больных животных, у которых клиническая картина была схожа с лептоспирозом. У больных животных наблюдалось гемо- глобинурия, атония желудочно-кишечного тракта, истощение.

Патологоанатомические изменения были выражены в печени и характеризовались изменением цвета органа до глинисто-желтого, увеличением в объеме, дряблостью консистенции печеночной ткани. Под капсулой и на разрезе были заметны мелкие некротические участки, окрашенные интенсивнее по сравнению с неизмененной паренхимой. Ткань органа в некоторых местах упругая и ломкая (Рис.1).

Рисунок 1 – Патологоанатомические изменения в печени павшей от лептоспироза коровы

Рисунок 2 – Почка павшей от лептоспироза коровы

Почки увеличены в объеме, капсула снимается легко, поверхность долек гладкая, нередко отмечаются неравномерное кровенаполнение или мелкопятнистые кровоизлияния в корковом слое.

Консистенция органа дряблая, ломкая (Рис.2).

Рисунок 3 – Кровоизлияния в легких коровы при лептоспирозе

В легких наблюдаются кровоизлияния, заполнение полостей серозно-геморрагическим экссудатом (Рис.3).

Селезенка дряблая, темно-бордового цвета, структура сглажена, имеет кашицеобразную консистенцию (Рис.4).

Рисунок 4 – Патологоанатомические изменения в селезенке коровы при лептоспирозе

В целом, патологоанатомическая картина характеризовалась множественными кровоизлия- ниями, выраженной паренхиматозной дистрофией печени, почек, селезенки и миокарда, микронекро- зами печени, гемоглобинурией.

В качестве патологического материала для бактериологического исследования были взяты кусочки паренхиматозных органов: печени, почек, селезенки, легкого и сердца. Посевы на питатель- ные среды проводили из каждого органа. Для контроля роста культуры микроскопировали в «темном поле» микроскопа каждые 5 дней, так как визуально определить рост лептоспир невозможно.

Особенностью культуральных свойств лептоспир является то, что при их росте на питательных средах не наблюдаются изменения в виде помутнения, осадка, специфического запаха. В результате бактериологических исследований из патологического материала (почка, селезенка) выделена и серологически идентифицирована культура L.pomona.

При постановке РМА у 19 животных из 27 исследованных обнаружены антитела к лептоспирам серогруппы Pomona, у 3 – перекрестная реакция Pomona и Icterohaemorrhagiae (титр на 1-3 разведения ниже), 5 – (титр 1:50). Из числа исследованных и серологически подтвержденных на

инфицированность лептоспирами животных у 17 голов параллельно провели исследование морфологических и биохимических показателей крови.

В июне 2022 года были доставлены образцы крови (для серологических и гематологических исследований) от 10 коров и патологический материал с/о Нура Алматинской области с подозрением на лептоспироз. Клинические признаки у КРС характеризовались общими признаками: периодическое повышение температуры, угнетение, отсутствие аппетита. Из специфических признаков были отмече- ны гемоглобинурия и желтушность слизистых оболочек. Заболевание имело характер хронического течения. С диагностической целью был проведен вынужденный забой одной коровы. Перед этим был произведен забор крови для гематологических исследований.

При осмотре животного были отмечены аналогичные с предыдущим случаем патолого- анатомические признаки, характерные для лептоспироза (рисунок 5,6).

Рисунок 5 – Желтушность серозных и слизистых оболочек при лептоспирозе

Рисунок 6 – Некротические очаги в печени крупного рогатого скота при лептоспирозе

Со всех органов также были сделаны посевы на питательные среду. Посевы с органов просматривались через каждые 5 дней в течение 40 дней. При этом роста лептоспир не обнаружено, что связано с лечением животного антибиотиками.

При серологическом исследовании крови коров с признаками лептоспироза установлено, что из доставленных 10 проб сыворотки крови животных в 4 случаях обнаружены антитела к Leptospira grippotyphosa в разведении 1:400, в одной пробе – к L. icterohaemorrhagiae на ++ в разведении 1:100.

Для определения степени тяжести течения заболевания в этом случае также были проведены гематологические исследования.

Анализ морфологических показателей производился подсчетом количества эритроцитов, лейкоцитов, уровнем гемоглобина в крови и лейкоформулой (таблица 1).

Таблица 1 – Морфологические показатели крови крупного рогатого скота при лептоспирозе

Показатели Норма Больные животные

Гемоглобины (в % Сали) 99-129 120,6±5,4

Эритроциты, в 1 мм³ крови, млн/мкл 5,0-7,5 4,61±0,39

Лейкоциты тыс/мкл, или 10⁹/л 4,5-12,0 4,3±0,39

Эозинофилы, % 3-8 4,6±0,03

Палочкоядерные нейтрофилы, % 2-5 10,55±0,08

Сегментоядерные нейтрофилы, % 20-35 18,4±0,31

Лимфоциты, % 40-65 37,51±0,07

Моноциты, % 2-7 5,13±0,12

СОЭ, мм/1 час 0,5-1,5 2,5-4,0

Примечание: n=37

При исследовании крови у коров отмечается уменьшение количества эритроцитов до 4,61±0,39 в 1 мм³ крови. Концентрация гемоглобина в норме составляет 99-129%, при нашем исследовании, вследствие угнетения эритропоэза показатель гемоглобина снижен до 120,6±5,4%. В лейкограмме также отмечаются значительные изменения. Учитывая уменьшение количество эритроцитов можно предположить, что при лептоспирозе идет медленное нарастание анемии, что связано с выделением лептоспирами капиллярных токсинов. При этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) составила 2,5- 4,0 мм/1 час. Таким образом, на увеличение СОЭ влияют изменения белкового состава крови, а также увеличение в крови желчных пигментов.

Количество лейкоцитов у коров увеличивается до 12 – 18 тыс/мкл, затем отмечается лейкопения, т.е., снижение лейкоцитов до 4,3 тыс/мкл.

Количество эозинофилов и моноцитов не выходило за пределы физиологической нормы и составило 5,13±0,12% и 4,6±0,03% соответственно. Однако палочкоядерные нейтрофилы значитель- но превышали показатели физиологической нормы и составляли в среднем 10,55±0,08%. В противо- положность им уровень сегментоядерных нейтрофилов был понижен – 18,4±0,31%, что характеризует развитие воспалительного процесса. Количество лимфоцитов составило 37,51±0,07%.

При увеличении процента молодых форм нейтрофилов возрастает числитель, что означает сдвиг ядра влево. Полученные данные подтверждают исследования Рудь, О.И. [14].

Биохимический анализ был начат с определения содержания общего белка. Потребность установления его концентрации во многом обусловлена той многообразной и важной физиологи- ческой ролью, которую играют белки плазмы в организме животных (Таблица 2).

Таблица 2 – Биохимические показатели крови у крупного рогатого скота, больных лептоспирозом

Показатели Норма Больные животные

Общий белок, г/л 72-86 70,5±1,1

АЛТ, Е/мл 25-50 98,59±3,2

АСТ, Е/мл 30-90 167,75±8,8

Щелочная фосфатаза, Е/л 18-153 121,2±8,5

Мочевина, ммоль/л 3,3-5,0 21,71±0,33

Креатенин мкмоль/л 14-107 142,21±8,3

Билирубин, ммоль/л 0,7-14 21,95±1,08

Глюкоза, ммоль/л 2,22-3,88 3,88±0,12

Гематокрит, г/л 24-46 18±8,2

Примечание: n=27

Из анализа полученных результатов видно, что при лептоспирозе у крупного рогатого скота происходят значительные изменения в печени, понижение общего белка составило 70,5±1,1 г/л, которое выражается повышением уровня ферментов аспартатаминотрансферазы до 167,75±8,8 Е/л и аллонинаминотрансферазы до 98,59±3,2 Е/л. Повышение печеночных ферментов связано с выделением лептоспирами большого количества гемолитических токсинов. Одновременно с этим происходит резкое увеличение уровня билирубина до 21,95±1,08 Е/л, которое указывает на повреждение желчных протоков. Уровень мочевины и креатинина повышаются до 21,71±0,33 ммоль/л и до 142,21±8,3 мкмоль/л, соответственно. Уменьшение гематокрита отмечается при анемиях, возникающих при многих инфекционных заболеваниях, в том числе и при лептоспирозе.

Полученные результаты подтверждают и дополняют данные ученых, изучавших патогенез лептоспироза людей и животных. Активная подвижность лептоспиры дает возможность им проходить

через эпителиальные барьеры клетки [29, С.8]. Причем способностью проникать in vitro в межклеточное соединение эндотелиальных клеток обладают патогенные лептоспиры, в то время как сапрофитные L. biflexa не могут преодолеть этот барьер [30]. Основными патогенетическими меха- низмами лептоспир вероятно является производство токсинов [29, С.8]. Образующиеся при распаде лептоспир эндотоксины (гемолизины) разрушают клетки крови, показателем которого является, появление морфологических, биохимических, гематологических изменений в макроорганизме, сопровождающимися желтухой, отеком, деструктивно-некротическими поражениями паренхимы печени, повреждением эпителия почечных канальцев и ткани печени, что приводит системной орган- ной недостаточности. Также эндотоксины лептоспир обладают свойством транспланцентарного прохождения, которое приводит к абортам во второй половине стельности [31].

Заключение

Лептоспироз у крупного рогатого скота независимо от серогруппы возбудителя характеризуется изменением показателей крови, снижением уровня гемоглобина до 120,6±5,4 %, эритроцитов до 39%

и увеличением скорости оседания эритроцитов до 40%. Из биохимических показателей отмечается увеличение уровня АЛТ и АСТ. Коэффициент Ритиса показывает соотношение активности АСТ и АЛТ (167,75±8,8 и 98,59±3,2 Е/мл), как известно у здоровых коров коэффициент составляет 1,6, в нашем случае активность ферментов АСТ и АЛТ составляло значение 1,7, что превышает референсные показатели. Выявленное значительное увеличение содержания в сыворотке крови печеночных фер- ментов АсАТ и АлАТ отражает существенные органические изменения функционального состояния клеток печени при остром и хроническом лептоспирозе крупного рогатого скота.

Информация о финансировании. Исследования проводились в рамках выполнения проекта по НТП «Изучить эпизоотологическую характеристику территории страны по особо опасным болезням и разработать ветеринарно-санитарные мероприятия по повышению их эффективности» по программно-целевому финансированию МСХ РК.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Бадра Б.М. Лептоспироз как зооантропоноз в мегаполисе: этиологическая структура, эпизоотологическиё и эпидемиологические особенности, диагностика, профилактика. [Текст] / Б.М. Бадра // автореф. на соиск.к.в.н. Санкт-Петербург – 2008 – 19 с.

2. Соболева Г.Л., Ананьина, Ю.В., Непоклонова Н.В. Актуальные вопросы лептоспироза людей и животных [Текст] / Г.Л. Соболева, Ю.В. Ананьина, И.В. Непоклонова //Российский ветеринарный журнал. – 2017. – № 8. – С. 13-14.

3. Кашапова СВ. Зависимость инфицированности крупного рогатого скота и лошадей лептоспирозом от географических факторов [Текст] / СВ. Кашапова // Сибирский вестник сельско- хозяйственной науки. – Новосибирск, 2007. – № 1 . – С. 124-126.

4. Болоцкий, И.А., Семенцов, В.И., и др. Эпизоотическая роль диких животных при лептоспирозе на Северном Кавказе [Текст] / И.А. Болоцкий // Ветеринария Кубани. – 2009. – № 3. – С. 15-16.

5. Thibeaux R, Iraola G, Ferre´s I, Bierque E, Girault D, et al. Deciphering the unexplored Leptospira diversity from soils uncovers genomic evolution to virulence. [Text] / Thibeaux R, Iraola G, Ferre´s I, Bierque E, Girault D, et al. // Microbial genomics: de la Nouvelle-Calédonie, 2018 – Р. 68-69.

6. Мулина Т.Б. Эпизоотологический надзор и контроль – важные составляющие биологической безопасности (на примере лептоспироза животных) [Текст] / Т.Б. Мулина // автореф. на соиск. к. в. н. – Н. Новгород – 2009 – 22с.

7. Гричаная С.В. Лептоспирозы лошадей в Новосибирской области [Текст] / С.В. Гричаная, И.В. Пяткина, В.Н. Кисленко // Проблемы развития коневодства, конного спорта, ветеринарного дела и иппотерапии: материалы науч. практ. конф. – Новосибирск, 2004. – С. 85-88.

8. Шатрубова Е.В. Особенности эпизоотического процесса лептоспироза в горных районах юга западной Сибири. [Текст] / Е.В. Шатрубова // автореф. на соиск. к.в.н. – Горно-Алтайск, 2015. – 45с.

9. Гричаная С.В. Географические особенности и этиологическая структура лептоспироза в Среднем Приобье [Текст] / С.В. Гричаная // Веста. НГАУ. – Новосибирск, 2005. – №2. – С. 42-48.

10. Резниченко З.М., Фёдорова Г.А. Новые случаи лептоспироза животных в Алтайском крае [Текст] / Резниченко З.М., Фёдорова Г.А. // Вестник Алтайского государственного аграрного университета № 7 (213). – Барнаул, 2022. – С. 52-55.

11. Мойсова Д.Л. Система гемостаза при лептоспирозе: патогенетические механизмы нарушений и оптимизация терапии компетенции [Текст]: /Д.Л. Мойсова // автореф. дис... докт.

медицин.наук. – Краснодар – 2020.–32с.

12. Murray G.L. The molecular basis of leptospiral pathogenesis. [Text] / G.L. Murray // Microbiol Immunol. 2015. – Р. 387-389