• Ешқандай Нәтиже Табылған Жоқ

موقعیت‌یابی ایمونوهیستوشیمیایی گرلین در بافت جفت گاو

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2022

Share "موقعیت‌یابی ایمونوهیستوشیمیایی گرلین در بافت جفت گاو"

Copied!
8
0
0

Толық мәтін

(1)

هرود

12 هرامش

1 ناتسبات 2318

هحفص یاه 308 - 302

تیعقوم

واگ‌تفج‌تفاب‌رد‌نیلرگ‌ییایمیشوتسیهونومیا‌یبای

این قازر دمحم یهللارکش ناهرب ،۱

۲

*

۱ . شناد هتخومآ دشرا یسانشراک

، ،یکشزپماد هدکشناد ،یماد مولع هورگ جدننس دحاو یملاسا دازآ هاگشناد

.ناریا ،جدننس ،

۲ . رایشناد

، یماد مولع هورگ

،یکشزپماد هدکشناد ، جدننس دحاو یملاسا دازآ هاگشناد

.ناریا ،جدننس ،

خیرات تفایرد :هلاقم / / ۱۹۰۱ :هلاقم شریذپ خیرات

۱۱ / / ۱۹۰۱

هدیکچ رد تیعقوم هعلاطم نیا تفاب رد نیلرگ یمیشوتسیهونمیا یبای

.تفرگ رارق یسررب دروم واگ تفج هب

روظنم تیعقوم بای رد نیلرگ ی

هاگراتشک زا هدام واگ جنپ ینتسبآ یاوتحم لک ،واگ تفج عمج

روآ ،تفج یزاسادج زا سپ .دش لقتنم هاگشیامزآ هب و هدش ی

کولب اه ماجنا یارب .دیدرگ هیهت یمیشوتسیهونومیا شیامزآ تهج یی تیعقوم

بای یتنآ زا ،نیلرگ یمیشوتسیهونومیا ی یداب

هب نیلرگ دض یشوم لانولکونوم یتنآ ناونع

یتنآ و هیلوا یداب یلپ یداب

نیبولگونمیا دض یغلاا لانولک (G

هب )HRP

یتنآ ناونع یداب

.دش هدافتسا هیوناث رضاح هعلاطم رد

هار تهج نآ رد نیلرگ دوجو ًلابق هک چوق هضیب هنومن زا یمیشوتسیهونمیا شیامزآ یزادنا

هب دوب هدش دییأت تبثم لرتنک ناونع

دش هدافتسا دوب تبثم لرتنک رد زادیسکورپونومیا شنکاو زا یکاح جیاتن هک

. مه مرس زا نینچ

هب یشوگرخ یتنآ یاج

هب هیلوا یداب هدافتسا یفنم لرتنک ناونع

زا یکاح جیاتن هک دش یصاصتخا

یتنآ ندوب نیلرگ یداب شنکاو و دوب

ا هدهاشم یفنم لرتنک رد زادیسکورپونومی .دیدرگن

هب جیاتن تسد لولس رد نیلرگ هک داد ناشن هدمآ یاه

کت هتسه و تسلابوفورت یا

لولس یاه هتسهدنچ تفج تفاب مویتیس نیس یا یم نایب واگ

نیا هب دوش شنکاو هک بیترت

میا و لولس رد زادیسکارپون یاه

کت هتسه لولس و تسلابوفورت یا یاه

هتسهدنچ دش هدهاشم واگ تفج تفاب مویتیس نیس یا .

نیا زا لصاح جیاتن ساسا رب

،شهوژپ یم هک تفگ ناوت یم نایب واگ تفج تفاب رد نیلرگ

دوش اما ، شقن یور رتشیب تاعلاطم تفج رد نومروه نیا قیقد یاه

هیصوت ینتسبآ للاخ رد و یم

وش

هژاودیلک ا:اه

ی هونوم ی شوتس ی م ی

، لولس ،تفج اه

ی تسلابوفورت

، اتشله واگ ی ن ، لرگ ی ن .

(2)

همدقم یدیتپپ ینومروه ،نیلرگ 82

هنیمآ دیسا ابلاغ هک تسا یا

ً

یم دیلوت شراوگ هاگتسد طسوت ددرگ

[ ۵۱ ].

یاراد نیلرگ

هتخانش لکش ود ( نیلرگ لیسآ سد هدش

نیلرگ و )DAG

هلیسآ یم ،هدش تفای نوخ شدرگ رد ود ره هک دشاب

یم دشهلیسآ نیلرگ اهنت اما دنوش لصتم نیلرگ هدنریگ هب ه

یم موزومورک یور ناسنا رد نیلرگ نژ .دوش 3

هدش عقاو

تسا [ 83 ] لیکشت نورتنیا هس و نوزگا راهچ زا نژ نیا .

ئتورپ و هدش نوزگا طسوت غلاب نی

یاه ۵ و 8 یم نایب .دوش

رگیدکی هب ینامتخاس رظن زا شوم و ناسنا رد نیلرگ نژ شیپ .دنتسه هیبش زا لکشتم ناسنا رد نیلرگ زاس

۵۵1

.تسا هنیمآ دیسا لمع نیدنچ یاراد نومروه نیا

دشر نومروه حشرت کیرحت هلمج زا یکیژولویزیف [

۵۱ و

8۲ ] یژرنا مسیلوباتم رد تلاخد و [

8۱ ] رب و دشاب یم

نوخ شدرگ ریثأت

دراد [ ۵۱ ] یم ناشن تاعلاطم .دشاب

هداد حشرت کیرحت ثعاب زونژوزگا نیلرگ قیرزت هک دنا

دشر نومروه [

8۲ ] شهاک و یرلاک فرصم شیازفا ،

یم یقورع متسیس تمواقم دوش

[ ۵۱ ] سنلااب ماگنه رد .

و دیلوت نازیم یژرنا تیعضو دوبهب یارب ،یژرنا یفنم یم ادیپ شیازفا هدعم رد نیلرگ حشرت دنک

[ ۵۱ و 8۵ ] .

یم ناشن نیلرگ هدنریگ هدرتسگ عیزوت نیلرگ هک دهد

رب ینیرکوتا و ینیرکاراپ تارثا ناگرا کی رد هدشدیلوت تفاب دراد فلتخم یاه .

رد نیلرگ هک تسا هدش هداد ناشن

رگید رد زین و کیپورتودانوگ روحم فلتخم حوطس تفاب یم نایب یلثمدیلوت یاه دوش

[ ۲ ] هب . یم رظن نیلرگ دسر

صخشم .دشاب هتشاد یلثمدیلوت متسیس رب یدانوگ ارف تارثا حشرت نیلرگ هک تسا هدش ساپ و راهم ارLH

هب خ ارGnRH

یم شهاک یهاگشیامزآ طیارش رد یتروصرد ،دهد

حشرت هک

یمن رارق ریثأت تحت ار FSH

رد تسا نکمم نیلرگ .دهد

تارثا .دشاب هتشاد تلاخد نیتکلاورپ حشرت لرتنک کیرحت حوطس رب نیلرگ هدننک غلاب ناسنا مرس نیتکلاورپ

حشرت نیلرگ هک تسا هدش شرازگ .تسا هدش تباث تکلاورپ یم راهم ییارحص شوم رد ار نی دنک

[ 2 ].

شرازگ زب و چوق ،نیاتشله واگ هضیب رد نیلرگ دوجو تسا هدش [

۵ ، 8 و 3 ] شهوژپ نیا رد . کینکت زا هدافتسا اب اه

فلتخم لحارم رد نیلرگ هک دش هداد ناشن یمیشوتسیهونمیا لولس ،زنژوتامرپسا نیاتشله رن واگ یلوترس و گیدیلا یاه

نایب یم یم نیلرگ اذل .دوش هب ار زنژوتامرپسا دناوت

شور

مه ،دنک میظنت نیرکاراپ ای و نیرکوتا هب ،نینچ

یدهاوش رطاخ

هضیب یدیلک لامعا تسا رداق نیلرگ دراد دوجو هک زا ،یا

مرپسا هلول نژ نایب هلمج ریثکت و نورتسوتست حشرت ،زاس

هولاع .دیامن میظنت ار گیدیلا لولس م رد ،نیارب

شو

لولس رد هک ینیلرگ هدش تباث ییارحص و گیدیلا یاه

تیعقوم یلوترس صاوخ یاراد تسا هدش یبای

یتنآ لباق یتنادیسکا تسا هجوت

[ ۵2 ].

نینج دشر زا تیامح رد مهم رایسب ناگرا کی تفج یم دشاب [ ۵3 ] نومروه . میظنت یاه

روحم یلصا هدننک

سوملااتوپیه هیحان رد هدنوش دیلوت کیپورتوتاموس -

دشر نومروه هدننکاهر نومروه دننام دیلوت زیفوپیه ( تفج رد ،نیتاتساوتاموس و دشر نومروه ،)GHRH

هدش ییاسانش دنا

[ ۱ ] نومروه نیا رب هولاع . ،اه

mRNA

( نآ یدرکلمع هدنریگ و نیلرگ

GHS-R1a

لوط رد )

ناسنا تفج رد ینتسبآ [

۵۱ ] دنفسوگ ، [

۵۵ ] ناگدنوج و

[ ۵۱ ] هدش ییاسانش میظنت شقن نیلرگ .دنا

هدننک رد یا

لکش دراد نینج یریگ نیا هب

هک بیترت هب

ونع نا یاهربمایپ

فلتخم لحارم یط یلولس لخاد تاطابترا یارب ییایمیش یم لمع نینج دشر دنک

[ 2 ] . مه نینچ تسا هدش شرازگ ،

ناردام نامرد هک نیلرگ اب ینتسبآ رخآ هلحرم رد نیلرگ اب

یم شوم رد نینج دشر کیرحت ثعاب ددرگ

[ 8۱ ] .

لوا لحارم رد اصوصخ دیلوت هخرچ لوط رد یریش واگ ً

هبور یژرنا یفاکان رادقم اب یهدریش هرود یم ور

لداعت .دوش

راب شهاک ثعاب واگ رد یفنم یژرنا یم یرو

کی هک دوش

(3)

طبترم یکیلوباتم زاین شیازفا زا یریگولج یارب یعیبط خساپ تسا ینتسبآ اب [

۱ ] یم ناشن دهاوش . نیا رد نیلرگ هک دهد

هب .دراد تلاخد دنیآرف مدع هک تسا هدش صخشم هولاع

شوم نایور دشر زا یهاگشیامزآ طیارش رد نیلرگ روضح یم تعنامم ینیزگ هنلا زا لبق دنک

[ ۵۲ ] زا نایور دشر رب رثا .

اب هک دیلوت رپ یریش یاهواگ رد هک دراد تیمها تهج نآ شدرگ رد نیلرگ تظلغ ،دنتسه هجاوم یژرنا لداعت مدع رد نآ هدنریگ و نیلرگ هچ رگا .تسا رتلااب اهنآ نوخ دنا ما هنوگ یلثم دیلوت فلتخم یاه هدش ییاسانش فلتخم یاه

تیعقوم رب ینبم یشرازگ اما تسا واگ تفج رد نآ یبای

تیعقوم قیقحت نیا ماجنا زا فده .درادن دوجو یبای

یریشواگ تفج تفاب رد نیلرگ ییایمیشوتسیهونومیا .دوب نیاتشله

شور و داوم اه

نص هاگراتشک رد شهوژپ نیا فلتخم لحارم ،جدننس ماد یتع

هاگشیامزآ و جدننس تثعب ناتسرامیب یژولوتاپ شخب تفاب ماجنا جدننس دازآ هاگشناد یکشزپماد هدکشناد یسانش

هنومن هدشراتشک هدام یاهواگ زا ،هاگراتشک رد .دش یتفاب یاه

ماد راتشک زا سپ .دش هیهت واگ سأر جنپ ینتسبآ یاوتحم اه

هب و لکناراک سپس و ادج لماکروط هسیک زا نودلیتوک

یاه

هنومن یارب و یزاسادج ینینج تمسق زا یریگ

رظن دروم یاه

نودلیتوک و لکناراک .دش لقتنم هاگشیامزآ هب یارب اه

کاپ رطقم بآ اب هاگشیامزآ رد دئاز داوم رگید و نوخ یزاس

هنومن تفج فلتخم تمسق زا .دندش هتسش ییاه

داعبا هب

۵

× ۱ / ۱

× ۱ / ۱ یتناس هنومن .دش هیهت رتم تمسق یاه

یاه

هب هطوبرم تاصخشم اب فلتخم روط

هناگادج

تساکینویرد رد هلصافلاب و دش هتشاذگ یکیتسلاپ یاه

نیلامرف ویتاسکیف لولحم ۵۱

هب % تدم 8۲ رارق تعاس

فافش ،یریگبآ لحارم یط سپس .تفرگ هتشغآ ،یزاس

یزاس

بلاق ،نیفاراپ اب کولب ،یریگ

اه عطاقم .دش هیهت ینیفاراپ ی تماخض هب یتفاب

۱ هنومن زا نورکیم طسوت یتفاب یاه

ملا یور و هیهت موتورکیم هاگتسد هدش هزینلایس هک ییاه

دندش سکیف ،دندوب [

۵ ، 8 و 3 ].

ینیفاراپ یتفاب عطاقم ادتبا ،یمیشوتسیهونمیا شیامزآ رد رگ رد هناخم ۱۱ یتناس هجرد هب دارگ

تدم 3۱ هداد رارق هقیقد

ملا .دندش یراج بآ اب و هنیفاراپد نیلیاز زا هدافتسا اب اه

تسش تاجرد اب کیلیتا لکلا طسوت سپس و دندش هداد وشو

هب یراج بآ اب هرابود هدش یهدبآ فلتخم هقیقد ود تدم

تسش لولحم اب دعب دندش هداد وشو هبPBS

قد جنپ تدم هقی

تسش ملا .دندش هداد وشو یتنآ یبایزاب تهج اه

هدافتسا اب نژ

( تارتیس رفاب زا

10 nM,pH=6

نب رد ) یرام یامد رد ۱۱

یتناس هجرد دارگ

هب تدم ۵۱ سپس دندش هداد رارق هقیقد

ملا ریغ یارب کلاب زادیسکورپ رد اه لاعف

تیلاعف ندش

هب یسونژودنا زادیسکورپ تدم

۱۱ فرگ رارق هقیقد ملا .دنت

اه

رد هبPBS

تسش هقیقد جنپ تدم رد سپس و هدش هداد وشو

هب قاتا یامد تدم

8۱ .دیدرگ یرادهگن ،ندش کنخ ات هقیقد

رد سپس هب PBS

تسش هقیقد جنپ تدم .دندش هداد وشو

هب ملا نآ لابند رد یواگ دصرد جنپ مرس اب اه

هبPBS

تدم

۵۱ تسش راب ود یارب هقیقد ب و هدش هداد وشو

یتنآ ا هیلوا یداب

یلپ(

یتنآ لانولک تکرش زا شوم رد هدشدیلوت یداب

Abbiotec

گولاتاک هرامش اب

ab57222

قیقر ) تبسن هب هدش

دصناپ هب کی رد

دصرد کی یواح PBS

قاتا رد BSA

یتناس هجرد راهچ یامد رد بوطرم هب دارگ

هنابش کی تدم

ملا .دندش هدناباوخ زور رد اه

راب هس یارب PBS

راب ره و

هب تدم جنپ تسش هقیقد ملا .دندش هداد وشو

یتنآ اب اه یداب

یتنآ( هیوناث یلپ یداب

دض لانولک تکرش زا شوم IgG

Abbiotec

گولاتاک هرامش اب

ab7083

هگوژنوک ) اب هدش

قیقر ،HRP

رد هدش هب PBS

تدم 8۱ - ۵۱ و هدناباوخ هقیقد

رد هب PBS

تدم ۵۱ تسش هقیقد یارب .دندش هداد وشو

یتنآ شنکاو ندرک نایامن یتنآ و نژ

یارتسبوس لولحم زا یداب

ید ( نیدیزنبونیمآ )DAB

رد

H2O2

هب تدم ۵۱ هدافتسا هقیقد

(4)

ملا سپس .دش تسش یراج بآ رد اه

زا .دندش هداد وشو

گنر لولحم نیزوئا هنیمز یزیمآ

- هدهاشم یارب نیلیسکوتامه

تفاب ملا سپس .دش هدافتسا لکلا طسوت اه

و یریگبآ کیلیتا

فافش یژولوتیس بسچ هرطق کی ندادرارق اب و دندش یزاس

هتنوم لمع ،لملا نتشاذگ و ملا یور یارب و ماجنا ندرک

دیلاسا یسررب .دش هدافتسا یرون پوکسورکیم زا اه

اب

هنومن یسررب هیهت یاه

هوهق گنر روهظ هدش هریت ات نشور یا

د هنومن رد زادیسکارپونمیا شنکاو زا ناشن یتفاب عطاقم ر یاه

.دوب هدش هیهت یتفاب

ثحب و جیاتن تهج قیقحت نیا رد تیعقوم

بای زا واگ تفج رد نیلرگ ی

یتنآ یداب هار تهج و دش هدافتسا هیوناث و هیلوا یاه یزادنا

لابق هک چوق هضیب هنومن زا یمیشوتسیهونمیا شیامزآ ً د نیلرگ دوجو نآ ر

دییأت دوب هدش هب

ناونع تبثم لرتنک

لکش(

-a

۵ .دش هدافتسا ) مه

نینچ ندوب یصاصتخا

یتنآ ب اب نیلرگ یداب ه

هب یشوگرخ مرس ندربراک یاج

یتنآ هیلوا یداب دییأت

دش لکش(

-b

۵ .)

لکش رد 8

واگ تفج تفاب یضرع عطقم

گنر یزیمآ یم هدهاشم نیلیسکوتامه نیزوئا اب هدش .دوش

جیاتن هب تسد یتنآ هک داد ناشن هدمآ لولس رد نیلرگ نژ

یاه

کت هتسه لولس و تسلابوفورت یا هتسهدنچ یاه

یا

نیس هب تسا ییاسانش و یبایدر لباق واگ تفج تفاب مویتیس

لولس رد زادیسکارپونمیا شنکاو هک بیترت نیا یاه

کت هتسه لولس و تسلابوفورت یا هتسهدنچ یاه

نیس یا

تفج تفاب مویتیس لکش( دش هدهاشم واگ

3 .)

واگ تفج تفاب رد نیلرگ روضح رضاح شهوژپ رد هعلاطم رد ،شیامزآ نیا جیاتن اب قباطت رد .دش هدهاشم یا

لماک رد نیلرگ هک دش هداد ناشن لوط رد تفج تفاب ندش

دراد یمهم شقن دنفسوگ ینتسبآ [

۵۵ ] شهوژپ نیا . نارگ

ثعاب دنفسوگ تفج رد نیلرگ دوجو هک دندرک دیکأت لماکت

مه و تفج ینمیا ینتسبآ هرود لوط رد تفج دشر نینچ

یم مه .دوش و نیئتورپ هک تسا هدش هداد ناشن نینچ

نازیم و دراد دوجو شوم و ناسنا تفج رد نیلرگ mRNA

یم ادیپ شهاک تفج لماکت اب نیلرگ ( دنک

۵۱ هتفای نیا .) اه

یم ناشن رضاح قیقحت زا لصاح جیاتن اب هارمه هک دهد

تفج ینتسبآ هرود رد نیلرگ دیلوت مهم عبانم زا یکی

یم یم ناشن نیاربانب ،دشاب لماع نیلرگ هک تفگ ناوت

یط رد تفج ظفح و دشر یارب یمهم نیرکاراپ /نیرکوتا هب ینتسبآ یم رامش دور [ 88 ] .

(a) (b)

لکش 2 ( . )a

دنفسوگ هضیب تفاب یضرع عطقم 1

( هلاس 300

هبوکنا هنومن :تبثم لرتنک ، یتنآ اب هدش

دض یصاصتخا لانولکونوم یداب

هیهت نیلرگ هوهق گنر .شوم زا هدش

لولس رد نشور یا لولس و ایاز یاه

ناشن یلوترس یاه یم زادیسکورپونمیا تبثم شنکاو هدنهد

.دشاب

( )b

فسوگ هضیب تفاب یضرع عطقم دن

1 ( هلاس 200

هبوکنا هنومن :یفنم لرتنک ، یتنآ یاج هب یشوگرخ مرس اب هدش

گنر مدع .هیلوا یداب

هوهق لولس رد یا لولس ،گیدیلا یاه

لولس و ایاز یاه ناشن یلوترس یاه

.تسا زادیسکورپونمیا شنکاو ندوب یفنم هدنهد

(5)

(a) (b)

لکش 1 هیهت واگ تفج یلومعم تفاب یضرع عطقم . گنر زا هدافتسا اب هدش

نیزوئا یزیمآ -

( ،نیلیسکوتامه )a

200 ( × )b

300

×

(a)

(b)

لکش 3 . ،واگ تفج تفاب یضرع عطقم یشیامزآ هنومن (

)a

200 ( × )b

300

× . هبوکنا هنومن یتنآ اب هدش

نیلرگ دض لانولکونوم یداب

هیهت هوهق گنر دوجو .شوم زا هدش مسلاپوتیس رد یا

لولس کت یاه هتسهدنچ و یا هتسه شلف( تسلابوفورت یا

)یکشم یاه ناشن

یتنآ دوجو و زادیسکارپونمیا تبثم شنکاو دنهد یم نیلرگ نژ

.دشاب

شهوژپ هداد ناشن اه یم نیلرگ هک دنا

ییاهر رد دناوت

هتشاد یعضوم شقن دنفسوگ رد تفج زا دشر نومروه ثعاب شقن نیا هک دشاب دوش ینتسبآ ماگنه رد محر دشر

ییامسلاپ تظلغ نیب یطابترا هک تسا هدیدرگ راهظا اما درادن دوجو دشر نومروه تظلغ و تفج نوخ رد نیلرگ

[ ۱ ] یم تفج نیلرگ رگید فرط زا . حشرت رب دناوت

نیاربانب .دراذگب رثا نینج و ردام یزیفوپیه دشر نومروه یم قتشم نیلرگ هک تفگ ناوت تسا نکمم تفج زا هدش

(6)

ب نینج دشر رب ه

قیرط زا میقتسمریغ روط حشرت کیرحت

.دراذگب رثا زیفوپیه دشر نومروه لولس رد نیلرگ قیقحت نیا رد و تسلابوفورت یاه

لولس یاه هتسهدنچ .دش ییاسانش واگ تفج تفاب یا

لولس لک رد ینمیا شنکاو تدش و تسلابوفورت یاه

لولس یاه هتسهدنچ .دوب فیعض واگ تفج تفاب یا

گنر تدش هب تبسن واگ تفج تفاب رد یریذپ

تفج

فیعض ییارحص شوم و ناسنا رد فلاتخا نیا .دوب رت

گنر تدش هب تسا نکمم یریذپ

عون رد توافت لیلد

یتنآ یداب هریج یتح و نس ،هدافتسا دروم اه .دشاب ییاذغ

تیقوم هب هجوت اب ،واگ تفج رد نآ نایب و نیلرگ یبای

ات یفلتخم تارثا ،شوم و ناسنا ب

ه تفاب رد نآ یارب لاح

شیپ تفج هداد ناشن تاعلاطم ،تسا هدش داهن

نیلرگ هک دنا

دوشب نینج دشر و لیکشت کیرحت ثعاب تسا نکمم زوتپوپآ و ریثکت یور یمیظنت رثا یاراد نیلرگ نوچ یم ،یلولس ( دشاب

88 هب .) هب هک ینیلرگ تلع نیمه روط

یم دیلوت تفج تفاب رد یعضوم یم لاامتحا دوش

ً دناوت

و زوتپوپآ و ریثکت مه

نچ نی نومروه راهم ای دیلوت یاه

تحت ار تفج ریثأت

نکمم نیلرگ ،نیاربانب .دهد رارق

تحت ار نینج یومن و دشر یتح تسا ریثأت

.دهد رارق

هب لولس رد نیلرگ نایب لیلد ینمیا متسیس فلتخم یاه

[ ۵8 ] یم تفج نیلرگ ، یجنایم شقن دناوت

رد ینمیا یرگ

یط یارب هک تسا هدش صخشم .دشاب هتشاد ینتسبآ ندرک

وم ینتسبآ کی ددرگ داجیا یوق ینمیا متسیس کی دیاب قف

[ ۵1 ] خساپ دیاب ینتسبآ اب ردام یراگزاس یارب . یوق یاه

ینمیا متسیس یازجا زا یفرط زا و یلولس هطساو اب ینمیا تیاسونوم لثم یتاذ لیفورتون و اه

دنوش لرتنک اه [

1 ] .

مه لولس رد نیلرگ هک تسا هدش هداد ناشن نینچ یاه

،B T

و لیفورتون لباق نازیم هب دشر نومروه هک اه دیلوت یهجوت

یم رب هولاع نیلرگ هک تسا نیا رب لاد بلطم نیا هک دوش

شقن یاراد دشر نومروه حشرت شیازفا یکیژولویب یاه

یم ینمیا متسیس رد یرگید هک تسا هدش هداد ناشن .دشاب

لوکلوم میظنت ثعاب و هداد شیازفا ار ینمیا خساپ نیلرگ اه

ی

یم یباهتلا دض مه .ددرگ

نایب رب یراهم رثا نیلرگ نینچ

نیکوتیس دراد یباهتلا یاه [

۵۵ ].

یم بیترت نیا هب تفگ ناوت

هولاع تفج نیلرگ کیرحت رثا رب

دشر و لیکشت رب یگدننک

هرود لوط رد زین ینمیا رد هطساو یشقن تسا نکمم ،نینج .دشاب هتشاد ینتسبآ لولس رد نیلرگ قیقحت نیا رد و تسلابوفورت یاه

لولس هتسهدنچ یاه تدش .دش ییاسانش واگ تفج تفاب یا

لولس لک رد ینمیا شنکاو لولس و تسلابوفورت یاه

یاه

هتسهدنچ ا تفج هب تبسن هعلاطم نیا رد واگ تفج تفاب ی

فیعض ییارحص شوم و ناسنا تدش رد فلاتخا نیا .دوب رت

گنر هب تسا نکمم یریذپ یتنآ عون رد توافت لیلد

یداب اه

هب هجوت اب .دشاب ییاذغ هریج یتح و نس ،هدافتسا دروم و ریثکت یور نیلرگ یمیظنت رثا دروم رد دوجوم دهاوش لولس زوتپوپآ ار تفج دشر و لیکشت تسا نکمم نیلرگ ،ی

هب هک ینیلرگ ساسا نیا رب .دنک کیرحت رد یعضوم روط

یم دیلوت تفج تفاب یم لاامتحا دوش

ً و زوتپوپآ و ریثکت دناوت

مه نومروه راهم ای دیلوت نینچ رارق ریثأت تحت ار تفج یاه

نینج یومن و دشر یتح تسا نکمم نیلرگ ،نیاربانب .دهد تحت ار شهوژپ ماجنا اما ،دهد رارق ریثأت نیا رد رتشیب یاه

هب یرورض صوصخ یم رظن

.دسر

بانم ع

۵ . ( ب یهللارکش ،ک یروصنم ۵3۱۱

تیعقوم .) یبای

هضیب تفاب رد نیلرگ یمیشوتسیهونومیا هیرشن ،زب

،یگدنزاس و شهوژپ رد یکشزپماد 3۱

( 8 :) ۵۱3 - ۵2۱ .

8 . ص یدمحم ،ب یهللارکش ،س یریزو قداص

( ۵3۱۱ .) تیعقوم هضیب تفاب رد نیلرگ یبای

چوق میدیدیپاو و شهوژپ رد یکشزپماد هیرشن ،

،یگدنزاس 3۱

( ۵ :) 2۵ - 1۱

(7)

3. Bayezidi-Azar A and Shokrollahi B. (2016) Immunohistochemical Localization of Ghrelin in Testicular Tissues of Holstein Bulls. Iranian Journal of Applied Animal Science 6 (3):

551-555.

4. 4. Barreiro ML, and Tena-Sempere M. (2004) Ghrelin and reproduction: a novel signallinking energy status and fertility? Molecular and Cellular Endocrinology 226: 1-9.

5. 5. Beam SW, and Butler WR. (1997) Energy balance and ovarian follicle development prior to the first ovulation postpartum in dairy cows receiving three levels of dietary fat. Biology of Reprodoction 56: 133-142.

6. Berry SA, Srivastava CH, Rubin LR, Phipps WR, and Pescovitz OH. (1992) Growth hormone-releasing hormone-like messenger ribonucleic acid and immunoreactive peptide are present in human testis and placenta. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 75: 281-284.

7. Bulla R, Fischetti F, Bossi F, and Tedesco F.

(2004) Feto-maternal immune interaction at the placental level. Lupus 13: 625-629.

8. Felix AM. (2010) Circulating ghrelin concentrations during the transition period of dairy cattle and the associated relationship with milk production. MSc Thesis, The university of Arizon.

9. Fuglsang J, Skjaerbaek C, Espelund U, Frystyk J, Fisker S, Flyvbjerg A. (2005) Ghrelin and its relationship to growth hormones during normal pregnancy. Clinical Endocrinology (Oxford) 62: 554-559.

10. Gualillo O, Caminos J, Blanco M, Garcia- Caballero T, Kojima M, Kangawa K (2001) Ghrelin, a novel placental-derived hormone.

Endocrinology 142: 788-794.

11. Harrison JL, Adam CL, Brown YA, Wallace JM, Aitken RP, Lea RG, et al. (2007) An immunohistochemical study of the localization and developmental expression of ghrelin and its functional receptor in the ovine placenta.

Reproductive Biology and Endocrinology 5: 25.

12. Hattori N, Saito T, Yagyu T, Jiang BH, Kitagawa K, and Inagaki C. (2001) GH, GH receptor, GH secretagogue receptor, and ghrelin expression in human T cells, B cells, and neutrophils. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 86:4284-4291.

13. Hay WW, Jr. (1995) Metabolic interrelationships of placenta and fetus.

Placenta 16: 19-30.

14. Kawamura K, Sato N, Fukuda J, Kodama H,

Kumagai J, Tanikawa H. (2003) Ghrelin inhibits the development of mouse preimplantation embryos in vitro.

Endocrinology 144: 2623-2633.

15. Kojima M, Hosoda H, Date Y, Nakazato M, Matsuo H, and Kangawa K. (1999) Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach. Nature 402: 656-660.

16. 16. Kojima M, and Kangawa K. (2005) Ghrelin: structure and function. Physiological Reviews 85: 495-522.

17. Lea RG, and Clark DA. (1989) The immune function of the endometrium. Baillière's Clinical Obstetrics and Gynaecology 3: 293-313.

18. Moretti E, Vindigni C, Tripodi SA, Mazzi L, Nuti R, Figura N. (2014) Immunolocalisation of ghrelin and obestatin in human testis, seminal vesicles, prostate and spermatozoa.

Andrologia 46: 979-985.

19. Nagaya N, Uematsu M, Kojima M, Ikeda Y, Yoshihara F, Shimizu W. (2001) Chronic administration of ghrelin improves left ventricular dysfunction and attenuates development of cardiac cachexia in rats with heart failure. Circulation 104: 1430-1435.

20. Nakahara K, Nakagawa M, Baba Y, Sato M, Toshinai K, Date Y. (2006) Maternal ghrelin plays an important role in rat fetal development during pregnancy. Endocrinology 147: 1333-1342.

21. Nakazato M, Murakami N, Date Y, Kojima M, Matsuo H, Kangawa K. (2001) A role for ghrelin in the central regulation of feeding.

Nature 409: 194-198.

22. Rak-Mardyla A, and Gregoraszczuk E. (2010) Effect of ghrelin on proliferation, apoptosis and secretion of progesterone and hCG in the placental JEG-3 cell line. Reproduction Biology 10: 159-165.

23. Sato T, Nakamura Y, Shiimura Y, Ohgusu H, Kangawa K, and Kojima M. (2012) Structure, regulation and function of ghrelin. Journal of Biochemistry 151: 119-128.

24. Takaya K, Ariyasu H, Kanamoto N, Iwakura H, Yoshimoto A, Harada M, et al. (2000) Ghrelin strongly stimulates growth hormone release in humans. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 85: 4908-4911.

25. Zhang W, Zhang Z, Chen J, and Tong D.

(2018) Ghrelin is expressed in the pregnant mammary glands of dairy goats and promotes the cell proliferation of mammary epithelial cells. General and Comparative Endocrinology 260: 115-124.

(8)

Animal Production

(College of Abouraihan – University of Tehran) Vol. 21  No. 2  Summer 2019

Immunohistochemical localization of Ghrelin in Cow Placenta Tissue

Mohammad Razaqnia1, Borhan Shokrollahi2*

1. Former M.Sc. Student, Department of Animal Science, Faculty of Veterinary Medicine, Sanandaj branch, Islamic Azad University, Sanandaj, Iran

2. Associate Professor, Department of Animal Science, Faculty of Veterinary Medicine, Sanandaj branch, Islamic Azad University, Sanandaj, Iran

Received: November 22, 2018 Accepted: May 4, 2019

Abstract

In the current study, immunohistochemical localization of Ghrelin was investigated in placenta tissue of Holstein cows. In order to localization of Ghrelin, pregnancy content of 5 cows were collected in abattoir and transferred to the laboratory. After, placenta separation, paraffin blocks were prepared. Mouse monoclonal anti-ghrelin antibody as the primary antibody and donkey anti-rabbit IgG (HRP) Polyclonal antibody as the secondary antibody were used to localise ghrelin in bovine placenta immunohistochemically. In the present study, to set up the immunohistochemistry test, the ram's testicular sample that existence of ghrelin had previously been confirmed in it,, was used as a positive control. The results indicated that immunoprooxidase reaction was performed in positive control. Also, the serum of rabbit was used as negative control instead of primary antibody. The results demonstrated that the antibody was specific for ghrelin and no immunoprooxidase reaction was observed in negative control. The results showed that ghrelin is expressed in mono and syncytium multinuclear trophoblast cells of bovine placenta, so that the immuno- peroxidase reaction was observed in mono and syncytium multinuclear trophoblast cells in bovine placenta. In general, according to the results of the current study, it can be concluded that ghrelin is expressed in the bovine placenta tissue; however, future studies should focus on the precise role of the hormone in the placenta during pregnancy.

Keywords: Ghrelin, Holstein cow, immunohistochemistry, placenta, trophoblast cells.

Ақпарат көздері

СӘЙКЕС КЕЛЕТІН ҚҰЖАТТАР

یتنمیا متتسیس درکلمع هک دش هداد ناشن هعلاعم نیا رد ناگدتنرپ زا دراوتم یت رب رد و تسانم هتخیمآ ناگدنرپ رد قتیقد یبایزرا یارب دنچره .دوب رتهب زین سار و

یم ناشن شیامزآ نیا نیاتن دتشر درکلمع ناد ةیهت اجنا راک رد راخب اب کارو یروآرف هقیقد ود هک دهد.. هجوج وگ یاه یم دوبهب

ولس ل نژ نایب و یداینب یاه لولس زوتپوپآ رد رثؤم

نکاژس تارذ ندژش قژلعم هب رجنم هدوهت نادرج دازفا زا یم نازژیم هژک مرگ یداوه و بآ طدارش رد تلاح ندا بدوش هژک درژس یداوژه و بآ طدارش اب هسداقم رد تسیاب

دراد یگتسب ینتسبآ هرود رخاوا رد یم هدذغت هب هرب ینام داه لاچ و ینتژسبآ رژخاوا لوژط رد اه یم هدذغت رد ی.. دشر،یرادهگن یارب ار یفاک نیئتورپ و یژرنا هکدراد دوجو

شرورپ هلاسوگ اه رد نیب شور یاه ولتخم یریگریش ناشن داد هک ریش یریگ ساسارب ارصم هدام خ کش یم دژناوت شور یدنمدوژس-. .دشاب دیلك

قژیقر یژنم حیقلت اب هدش داجدا یروراب و هدنز مرپسا نازیم هژعلاطم اژب هسداقم رد ،لدوستلب اب ود هب کد تبسن هب هدش ه یم رظن هب .دش دروآرب رتشیب رضا یشان

رد یژبرچ مژسیلوباتم رد رژیگرد یاژه نژ رداژس یبسن نایب نورژب وژلب رن دازفا هب رجنم هک داد دازفا ار کمخت دیژسا دادز یاه تظلغ دوب یلاهرد ندا .دش زب کمخت ینت برچ